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ljy1632002銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
流動相中加入離子對試劑
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| 求助，現(xiàn)在再做一個藥典方法重現(xiàn)，藥典方法里面流動相配制為：6.8g/L磷酸氫二鉀和0.85g/L的庚烷磺酸鈉，用磷酸調(diào)pH2.8，抽濾，乙腈：緩沖液按照5：95混合。進紫外檢測器檢測樣品，基線波動很大，液相色譜儀是waters2695/2489，新儀器，有什么好的辦法可以解決基線波動大的問題么？ |
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基線波動大有幾個可能的因素導(dǎo)致 1、室溫變化可能引起波動，加個柱溫箱可以改善 2、柱子沒有平衡好。 3、乙腈和水相混合后，有沒有除氣泡 4、本身你的流動相緩沖鹽比例太高，也是一種可能。 |
ljy1632002
2樓2012-06-14 10:43:02
ljy1632002
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1、首先說你這樣的緩沖鹽濃度不會造成基線波動變大，這是肯定的。 2、你的檢測波長是多少？磷酸鹽和庚烷磺酸按的截止波長都是低于210nm的。 如果你的檢測波長高于或等于210nm肯定沒問題，低于就有點問題了。 3、還有一點，離子對試劑是表面活性劑，說白了就是像肥皂，所以說很容易被其他東西污染，也很容易污染其他東西（殘留），還有就是庚烷磺酸的的級別要高，要色譜級別才可以。 4、離子對的平衡時間普遍要2h以上，因為離子對試劑要占據(jù)色譜柱上空余的硅羥基位點，這需要時間。 5、排除下你的HPLC系統(tǒng)有沒有問題 |
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4樓2012-06-14 11:09:03
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