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小雨莎莎木蟲 (正式寫手)
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[交流]
請教做VEGF促進(jìn)細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)的相關(guān)事情 已有4人參與
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最近一直都在用B16摸索VEGF促進(jìn)增殖的濃度和藥物抑制的濃度的實(shí)驗(yàn)，但是的出來的結(jié)果總是不好。 我是用96孔板接種，每空接種約2500個(gè)細(xì)胞。然后培養(yǎng)約16-24h后用無血清培養(yǎng)基處理24h，然后加VEGF（用無血清DMEM培養(yǎng)基配制，每次都是現(xiàn)用現(xiàn)配），設(shè)置的濃度有200ng/ml，100ng/ml和50ng/ml，按照文獻(xiàn)的說法是10ng/ml處理48h都能夠有反應(yīng)的，但是我用VEGF處理72h，中間不換液，然后用MTT檢測，但是結(jié)果總是很不好，用無血清培養(yǎng)基處理的細(xì)胞作為對(duì)照，VEGF處理的有時(shí)候甚至比無血清的對(duì)照還要低，根本就看不出有什么變化。 而且還有一個(gè)問題就是每次接種完，在換無血清培養(yǎng)基處理24h后細(xì)胞數(shù)量看起來還是比較正常的，但是經(jīng)過72h培養(yǎng)后就明顯看出同一個(gè)處理不同孔細(xì)胞的密度不一樣，照理來說我接種的時(shí)候都是先配好適當(dāng)?shù)臐舛榷曳磸?fù)混勻后才接種的，是不是這樣也會(huì)影響檢測結(jié)果？但是VEGF處理的不論是哪個(gè)處理都沒有明顯差別~哪位蟲友能指點(diǎn)一下?謝謝！ [ Last edited by 小雨莎莎 on 2012-6-19 at 20:51 ] |
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