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[交流]
6%變性聚丙酰胺凝膠電泳SSR引物篩選 已有6人參與
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我是SSR引物篩選新手,有好多問題呀,請各位高手指點迷津~ (1)我是跑的六一廠24B型號,很小的那種垂直電泳槽,染色時膠要與玻璃板脫離,我做的是1mm的6%變性聚丙烯酰胺凝膠,在固定、染色、顯色的過程中要轉(zhuǎn)移凝膠,膠很容易就弄碎了,請問有什么好方法可以防止膠塊碎裂。 (2)我用的500ml的顯色液,將兩塊膠一起染色,顯色液中包括15g的Na2CO3,750ul的甲醛溶液和50ul的硫代硫酸鈉,我是先將Na2CO3溶解在500ml的蒸餾水中,放入冰箱冷卻,拿出來后再加入甲醛和硫代硫酸鈉。在顯色過程中顯色不均是什么原因?就是條帶有的出現(xiàn)的早有的出現(xiàn)的晚,最后導(dǎo)致有的染的特別深,有的染的特別淺。 (3)我用的方法都與之前師兄師姐跑的那種最大的玻璃板是一致的,只是因為膠更小,所以我用的試劑都按一定比例縮小了,就如上面的顯色液的配方,縮小了1/4,這樣做可行嗎? 問題還有很多,急需各位幫助,謝謝! |


鐵桿木蟲 (著名寫手)

新蟲 (小有名氣)
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