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chenweilala

金蟲 (小有名氣)

[求助] 發(fā)酵罐放大培養(yǎng)時(shí),為何延遲期會(huì)很長(zhǎng)

本人現(xiàn)在在做真菌發(fā)酵放大的中試試驗(yàn),從搖瓶到100L發(fā)酵罐,先前在搖床培養(yǎng)時(shí),發(fā)酵周期一般為5-6天,但是,現(xiàn)在在100L罐子上的發(fā)酵周期必須在8天左右才能達(dá)到搖瓶的水平,敢問(wèn)那位大神可以為小弟傳點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)?在轉(zhuǎn)速、溫度、溶氧方面給點(diǎn)提示
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liurechen

銀蟲 (小有名氣)

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)看,你應(yīng)該比較一下?lián)u瓶培養(yǎng)基和小罐培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)短有沒(méi)有明顯不同,培養(yǎng)體積越大升溫和降溫過(guò)程越長(zhǎng),對(duì)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的破壞越厲害,生產(chǎn)上也會(huì)經(jīng)常遇到相同的問(wèn)題。試試加大接種量,同時(shí)做一下糖分分析和氨基氮的分析,同時(shí)滅菌后培養(yǎng)基pH有可能會(huì)產(chǎn)生變化,這和搖瓶的情況也不一樣,需要注意一下這些細(xì)節(jié)。
相爭(zhēng)兩蝸角,所得一牛毛。 且滅嗔中火,休磨笑里刀。
8樓2012-07-04 11:10:01
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wgy2007

木蟲 (小有名氣)

【答案】應(yīng)助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感謝參與,應(yīng)助指數(shù) +1
chenweilala: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-07-03 10:01:27
1.接種量:接種量少了會(huì)導(dǎo)致延遲期長(zhǎng),加大接種量試一下,一般從種子罐接種到發(fā)酵罐接種量2-10%。
2.轉(zhuǎn)速的控制:如果你培養(yǎng)的是霉菌的起始轉(zhuǎn)速要低一些,一般在200-300rpm,溶氧低于你要控制的水平時(shí)再適當(dāng)提高轉(zhuǎn)速,現(xiàn)在的發(fā)酵罐可以做到轉(zhuǎn)速與溶氧關(guān)聯(lián)。
3.我做過(guò)一種蛋白酶的發(fā)酵,要求溶氧>=30%(注:接種前校正溶氧100%時(shí)通風(fēng)比為1:1,轉(zhuǎn)速500-600rpm,罐壓按設(shè)定的即可,校正完溶氧后再把風(fēng)量、轉(zhuǎn)速降到起始的水平后接種)。
4.風(fēng)量的控制,一般起始通風(fēng)比為1:0.3,當(dāng)提高轉(zhuǎn)速不能滿足溶氧要求時(shí)要適當(dāng)提高通風(fēng)量。
5.罐壓的控制,一般為0.05-0.1Mpa。
僅供參考,主要還是要根據(jù)培養(yǎng)菌種的實(shí)際情況確定。
2樓2012-07-03 09:37:56
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chenweilala

金蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by wgy2007 at 2012-07-03 09:37:56
1.接種量:接種量少了會(huì)導(dǎo)致延遲期長(zhǎng),加大接種量試一下,一般從種子罐接種到發(fā)酵罐接種量2-10%。
2.轉(zhuǎn)速的控制:如果你培養(yǎng)的是霉菌的起始轉(zhuǎn)速要低一些,一般在200-300rpm,溶氧低于你要控制的水平時(shí)再適當(dāng)提高轉(zhuǎn) ...

敢問(wèn)大仙,您所說(shuō)的發(fā)酵前溶氧校正100%的措施是從哪得來(lái)的,我現(xiàn)在滅完菌后,溶氧100%的標(biāo)定都是在發(fā)酵所需的溫度、轉(zhuǎn)速、通氣量時(shí)進(jìn)行的(發(fā)酵罐使用手冊(cè)上也是明文規(guī)定的)?
還有,那個(gè)通風(fēng)比1:1,1:0.3是什么意思?
3樓2012-07-03 10:07:17
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xiaoqing518

木蟲 (小有名氣)

首先確定一下接種量,接種量太少會(huì)導(dǎo)致遲滯期延長(zhǎng),大罐發(fā)酵的接種量一般比較大,多的可以達(dá)到20%
其次,是不是轉(zhuǎn)速太高剪切力太大,影響菌體生長(zhǎng)。
4樓2012-07-03 11:06:50
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wgy2007

木蟲 (小有名氣)

溶氧100%的校正根據(jù)別人提供的資料得來(lái)的,我做過(guò)的細(xì)菌、酵母、霉菌的發(fā)酵溶氧的校正技術(shù)提供方都是這么給的,原因沒(méi)有做過(guò)研究,根據(jù)實(shí)際情況定,不一定按著我說(shuō)的做。
通風(fēng)比:如果發(fā)酵培養(yǎng)基的體積為60L,通風(fēng)比1:1,通入無(wú)菌空氣的流量為60L/min,通風(fēng)比1:0.3通入空氣的量為18L/min,具體的空氣流量還要根據(jù)進(jìn)空氣的壓力和罐壓進(jìn)行計(jì)算,這個(gè)應(yīng)該都會(huì)算的。
5樓2012-07-03 15:29:42
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chenweilala

金蟲 (小有名氣)

引用回帖:
4樓: Originally posted by xiaoqing518 at 2012-07-03 11:06:50
首先確定一下接種量,接種量太少會(huì)導(dǎo)致遲滯期延長(zhǎng),大罐發(fā)酵的接種量一般比較大,多的可以達(dá)到20%
其次,是不是轉(zhuǎn)速太高剪切力太大,影響菌體生長(zhǎng)。

萬(wàn)分感謝
6樓2012-07-03 18:59:08
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chenweilala

金蟲 (小有名氣)

引用回帖:
5樓: Originally posted by wgy2007 at 2012-07-03 15:29:42
溶氧100%的校正根據(jù)別人提供的資料得來(lái)的,我做過(guò)的細(xì)菌、酵母、霉菌的發(fā)酵溶氧的校正技術(shù)提供方都是這么給的,原因沒(méi)有做過(guò)研究,根據(jù)實(shí)際情況定,不一定按著我說(shuō)的做。
通風(fēng)比:如果發(fā)酵培養(yǎng)基的體積為60L,通風(fēng) ...

感謝解答!
7樓2012-07-03 19:56:10
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chenweilala

金蟲 (小有名氣)

引用回帖:
8樓: Originally posted by liurechen at 2012-07-04 11:10:01
根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)看,你應(yīng)該比較一下?lián)u瓶培養(yǎng)基和小罐培養(yǎng)基滅菌時(shí)間長(zhǎng)短有沒(méi)有明顯不同,培養(yǎng)體積越大升溫和降溫過(guò)程越長(zhǎng),對(duì)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的破壞越厲害,生產(chǎn)上也會(huì)經(jīng)常遇到相同的問(wèn)題。試試加大接種量,同時(shí)做一下糖分 ...

是的,就是不知道滅菌后,是不是培養(yǎng)基成分受到蒸汽的破壞從而使菌體不可利用。我的pH在初始時(shí)是5.5.滅菌后為5左右,影響不大!
多謝提示,感謝萬(wàn)分!
9樓2012-07-04 12:09:29
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liurechen

銀蟲 (小有名氣)

經(jīng)驗(yàn)上來(lái)看,一般比較粗壯的真菌比如黑根霉對(duì)攪拌剪切更為敏感,因?yàn)樗诎l(fā)酵過(guò)程中一般是絮狀懸浮,很容易打碎后造成自溶,影響生產(chǎn),而比較細(xì)的菌絲對(duì)攪拌剪切不是太敏感,因?yàn)樗鼈円话阋跃z球的狀態(tài)存在,對(duì)溶氧更加敏感。如果存在上述問(wèn)題試著改變一下攪拌槳的樣式,比如由直葉渦輪式改為箭葉渦輪式攪拌槳。
相爭(zhēng)兩蝸角,所得一牛毛。 且滅嗔中火,休磨笑里刀。
10樓2012-07-05 10:29:22
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