 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2308 | 回復(fù): 9 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
Q柱堵了，該怎么樣清洗
|
|||
| 大家好，我最近用Q柱純化蛋白，剛開始上樣時(shí)沒(méi)有問(wèn)題，用完用Nacl洗時(shí)剛開始也沒(méi)什么問(wèn)題，可是過(guò)完20%乙醇后開始有點(diǎn)堵，后來(lái)用了2次后，Q柱開始非常堵，上樣都沒(méi)辦法進(jìn)行，各位大俠支支招，什么清洗方法比較好？急用，先行謝過(guò)哈 O(∩_∩)O~ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
0856材料專碩353求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
279分求調(diào)劑 一志愿211
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
材料學(xué)學(xué)碩080502 337求調(diào)劑-一志愿華中科技大學(xué)
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085601調(diào)劑 358分
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
0856 271求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
一志愿重慶大學(xué)085700資源與環(huán)境總分308求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
268求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
302求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 柱子堵了可以用0.05M的稀硫酸沖嗎？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 液相濾頭堵了，該怎么清洗呢？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- FPLC蛋白純化堵柱子？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- UPLC 柱子堵塞
已經(jīng)有34人回復(fù)
- ODS柱子堵了，怎么沖啊？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 色譜柱堵，求如何沖柱
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 柱層析用的柱子的塞板堵住了，該怎樣來(lái)清洗
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 色譜柱堵了 應(yīng)該怎么處理？甲醇沖壓力就特別大
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于高效液相柱子堵塞的問(wèn)題 急急急！�。。。�！
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助】tosoh TSKgel G4000PWxl柱堵住了該怎么清洗
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助】液相柱堵了怎么辦
已經(jīng)有21人回復(fù)
dshlove
木蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 9
- 應(yīng)助: 237 (大學(xué)生)
- 金幣: 4764.7
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 帖子: 852
- 在線: 419.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1609389
- 注冊(cè): 2012-02-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 污染控制化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
看天: 金幣+3, BioEPI+1, 授予 2012-07-05 13:39:25
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
看天: 金幣+3, BioEPI+1, 授予 2012-07-05 13:39:25
|
首先得確定你i是什么東西堵住了，按照你的介紹來(lái)看，很有可能是蛋白堵柱子了。給你個(gè)清洗方案，參考下。 1． 日常清洗 每次使用后，先用2 – 5 個(gè)柱體積的100% B（其中需含1M鹽如NaCl）清洗柱子，再用純水平衡柱子3 – 5柱個(gè)體積。 2． 每月清洗（使用10次左右，柱子的壓力上升，分辨率下降時(shí)） 0.3M NaOH 充滿一個(gè)柱體積，室溫放置3-5個(gè)小時(shí)，再用純水平衡3-5個(gè)柱體積。 3． 季度清洗（每月保養(yǎng)進(jìn)行了3次左右，且按照每月保養(yǎng)操作后效果不明顯時(shí)） Inject 2 ml 1 M NaCl溶液，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平. Inject 2 ml 1 M NaOH溶液，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平 Inject 2 ml 1 M NaCl溶液，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平 Inject 2 ml 1 M HCl溶液，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平 Inject 2 ml 75% 乙酸，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平 Inject 5 ml 1 M NaCl溶液，用純水沖洗5個(gè)體積直至UV沖平 4.強(qiáng)力清洗（半年或一年） ⑴.親水性蛋白和多肽 用溶有去污劑的溶液（例：含0.2%Triton的緩沖液）以較慢的流速過(guò)夜清洗柱子，用純水沖凈 用1M NaOH 流速0.8 ml/min 過(guò)夜清洗，用純水沖凈，再用2M NaCl 洗脫雜蛋白，用純水沖凈， 10% DMSO(二甲基亞砜)過(guò)夜清洗，用純水沖凈，再用2M NaCl 洗脫雜蛋白，用純水沖凈 30%乙酸 流速0.8ml/min 過(guò)夜清洗 如用以上步驟清洗后柱子性能仍然沒(méi)有恢復(fù)，可用50mM Tris pH 7.5，10mM CaCl2， 0.1mg/ml Proteinase K溶液室溫過(guò)夜或37℃ 1h清洗 ⑵ .核酸 通常用10 mM Tris-HCl,1mM EDTA, pH 8.0 以低流速過(guò)夜溶解沉淀的核酸 ①.RNA Inject 一個(gè)柱體積的0.5 M NaOH放置1h，用純水沖凈，一個(gè)柱體積的3 M KCl清洗，用純水沖凈，inject 40 ml 0.1mg/ml RnaseI 0.1 M NaCl, 50 mM Tris-HCl, pH 7.5,37℃放置2h,用10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0沖凈，再用一個(gè)柱體積的3 M KCl清洗，用純水沖凈。 ②.DNA Inject一個(gè)柱體積的0.5 M HCl放置2h，用純水沖凈，Inject一個(gè)柱體積的0.5 M NaOH放置1h，用純水沖凈，一個(gè)柱體積的3 M KCl清洗，用純水沖凈，inject 40 ml 0.1mg/ml DnaseI 0.1 M NaCl, 10 mM MgCl2 50 mM Tris-HCl, pH 7.5,37℃放置2h, 用10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0沖凈，再用一個(gè)柱體積的3 M KCl清洗，用純水沖凈。 ⑷.脂類 在中性或酸性溶液中加入去污劑（例：含0.2%Triton的緩沖液），流速0.8ml/min過(guò)夜清洗，然后用100%乙醇洗凈去污劑，再用純水沖凈。 |
水墨藍(lán)3樓2012-07-05 08:48:40
冼亮淀粉酶
專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
-
專家經(jīng)驗(yàn): +248 - BioEPI: 73
- 應(yīng)助: 257 (大學(xué)生)
- 貴賓: 0.272
- 金幣: 19457.4
- 散金: 1704
- 紅花: 121
- 帖子: 6586
- 在線: 2777.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 856414
- 注冊(cè): 2009-09-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
- 管轄: 微生物
2樓2012-07-04 21:54:09
gelois
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 59 (初中生)
- 金幣: 6015.3
- 紅花: 2
- 帖子: 375
- 在線: 149.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 1655503
- 注冊(cè): 2012-03-01
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
4樓2012-07-05 10:37:18
5樓2012-07-16 10:22:33
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 313求調(diào)劑 +3 | 肆叁貳壹22 2026-03-19 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +5 | 睿08 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，求調(diào)劑 +5 | 材化逐夢(mèng)人 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +9 | 何潤(rùn)采123 2026-03-18 | 11/550 |
|
|
|
[考研]
 材料與化工 322求調(diào)劑
+4
|
然11 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中農(nóng)業(yè)071010，總分320求調(diào)劑 +3 | 困困困困坤坤 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 295材料求調(diào)劑，一志愿武漢理工085601專碩 +5 | Charlieyq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 081700化工學(xué)碩調(diào)劑 +3 | 【1】 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 申博26年 +3 | 八6八68 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +9 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +4 | z1z2z3879 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 26博士申請(qǐng) +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 301求調(diào)劑 +4 | A_JiXing 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
|