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小米小丑新蟲 (初入文壇)
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[求助]
我想測(cè)土壤磷酸酶。不過里面有個(gè)試劑叫：氯代二溴對(duì)苯醌亞胺、太貴了。怎么辦？
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老師又不想花錢買 這個(gè)實(shí)驗(yàn)還能做下去嗎？ 各位大俠都是怎么測(cè)得？ |
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淡色系
新蟲 (初入文壇)
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5樓2012-07-10 19:04:22
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pj198811
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【答案】應(yīng)助回帖
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以下是我本科畢業(yè)論文做過的 ····························································· 堿性磷酸酶采用磷酸苯二鈉比色法： 1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取1、3、5、7、9、11、13ml酚工作液，置于50ml容量瓶中，分別加入20ml蒸餾水，再加0.25ml PH9.8氯化銨-氫氧化銨緩沖液，0.5ml 4-氨基安替比林液，0.5ml鐵氰化鉀，每次加入需充分搖勻，最后定容至50ml ，15min內(nèi)在510nm處比色.以含酚的毫克數(shù)為縱坐標(biāo)，以O(shè)D值為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 2.磷酸酶活性測(cè)定：稱取5g土樣風(fēng)干，于50ml三角瓶中，加5滴甲苯后，加20ml 0.5％ 磷酸苯二鈉，充分震蕩后于37℃恒溫培養(yǎng)2h，取培養(yǎng)后的濾液3ml，按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法顯色，比色測(cè)定。 3.結(jié)果計(jì)算 磷酸酶活性=a×稀釋倍數(shù)（200/3）×0.32×2.29/h a—3ml濾液酚的毫克數(shù) 0.32—以磷為單位表示結(jié)果的系數(shù)（在磷酸苯二鈉中，1個(gè)重量單位的酚，相當(dāng)于0.32重量單位的磷） 2.29—將P換算為P2O5的系數(shù) 單位：mg•P2O5•g-1•h-1 |
4樓2012-07-09 09:24:33
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