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hnny505金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
甲醇提取液，低溫處理后白色沉淀物主要是什么類的物質(zhì) 已有1人參與
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| 采用甲醇為溶劑，提取甜玉米中的真菌毒素，清澈的提取液于-12℃保存之后，會(huì)有碎渣狀白色物質(zhì)沉淀，恢復(fù)至室溫時(shí)也沒(méi)有溶解，想請(qǐng)教這種沉淀物一般是哪類物質(zhì)，有可能是糖類嗎？該怎么去除呢，敢請(qǐng)大神指點(diǎn)迷津，小弟拜謝了。 |
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zypei
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2樓2012-07-10 21:23:07
hnny505
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3樓2012-07-11 09:26:30
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【答案】應(yīng)助回帖
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lqf808: 金幣+10, 非常詳細(xì)的應(yīng)助，歡迎常來(lái)農(nóng)林版 2012-07-11 16:50:13
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(HPLC )樣品的提取及色譜分析 用磨粉機(jī)粉碎樣品,在均質(zhì)杯中加入50g面粉、10g PEG和200mL去離子水，高速均質(zhì)1min后，用定性濾紙過(guò)濾，然后再用微纖維濾紙(934AH, φ11 cm, 1.5µm, Whatman)過(guò)濾。將1mL上述濾液以1滴/秒的流速通過(guò)DON-test免疫親和柱，直至空氣進(jìn)入柱子。用5mL超純水以2滴/秒的流速?zèng)_洗柱子，直至空氣進(jìn)入柱子。加1.0 mL甲醇以1滴/秒的流速淋洗柱子，將甲醇洗脫液收集于玻璃試管中。洗脫液在氮吹儀上吹干，最后用300µL的流動(dòng)相定容。注入20µL樣品或DON標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行HPLC測(cè)定。 (GC-MS )取粉碎好的小麥樣品面粉4g，放入50mL離心管中，加入16mL的提取液（乙晴：水=84：16），搖床上水平震蕩提取1h。取4ml過(guò)層析柱（C18：中性氧化鋁按1：3混合，將1g混合填料填入5mL的注射器中，上、下均放上濾紙片），將1mL濾液轉(zhuǎn)至2mL小瓶中，用氮?dú)獯蹈�。加�?00µL TMS試劑（TMSI：TMCS=100：1），并轉(zhuǎn)動(dòng)小管，反應(yīng)10min后，小瓶中加入1mL的Mirex-isooctane（4mg/L），上下?lián)u動(dòng)幾次，再加入1mL 超純水，用旋渦儀震蕩后，吸取上清液放入GC-MS進(jìn)樣瓶中，供氣質(zhì)聯(lián)檢分析。單籽粒的提取程序基本相同，只是加提取液后需保持24h，TMS試劑和Mirex-isooctane的用量分別為25µL、150µL。 |
4樓2012-07-11 10:04:44
jjaififi
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5樓2012-07-12 00:08:21
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6樓2012-07-13 12:40:45
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hnny505: 回帖置頂 2012-07-22 09:06:32
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不好意思,回復(fù)晚了.對(duì)于粗提物我一般的除去糖和油脂的方法如下.粗提物用大量水溶解,用SPE柱粗分.首先用純水洗脫,然后80%左右的甲醇.一般水洗脫能去大部分的糖,80%甲醇洗脫部分進(jìn)一步分離,而小極性的油脂則保留在SPE柱上.上面的方法有幾點(diǎn)要注意的.1.SPE柱不要過(guò)載,我最多LOAD柱填料10%的樣品;2.洗脫的體積,我一般用2個(gè)柱體積(商業(yè)化的SPE柱有填料質(zhì)量和柱子體積的).最后要提醒的是要根據(jù)你的樣品來(lái)優(yōu)化上述SPE過(guò)程. |
7樓2012-07-22 02:14:56
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8樓2015-12-24 11:23:45
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