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硫酸咔唑法與硫酸苯酚法的區(qū)別？
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請(qǐng)教各位蟲(chóng)友，硫酸咔唑法和硫酸苯酚法在測(cè)多糖含量時(shí)的原理和計(jì)算方式有什么區(qū)別�。� 1.看文獻(xiàn)和資料有的說(shuō)硫酸咔唑法測(cè)的是多糖中酸性成分的含量，而硫酸苯酚法測(cè)的是總糖的含量，這兩種方法反映在原理上到底有什么區(qū)別呢？ 2.是不是酸性糖在硫酸作用下水解成單糖，然后再分解成含有-COOH基團(tuán)的糠醛，此糠醛能與咔唑反應(yīng)生成紫紅色的化合物而顯色，那么其余不含-COOH的糖部分，盡管最后也生成了糠醛，但是這個(gè)糠醛基團(tuán)上因?yàn)闆](méi)有-COOH而無(wú)法與咔唑反應(yīng)顯色呢？ 3.那么硫酸苯酚法之所以能測(cè)總糖的含量，是不是因?yàn)椴还芩嵝灾行缘亩嗵撬鼈兯獬蓡翁呛笞詈蠖挤纸獬煽啡徽撨@個(gè)糠醛上帶什么樣的基團(tuán)都能跟苯酚發(fā)生酚醛縮合反應(yīng)生成橙黃色化合物而在~490nm有吸收呢？ 4.對(duì)于硫酸咔唑法所測(cè)酸性多糖的含量，我對(duì)于文獻(xiàn)的表述理解不是很清晰，請(qǐng)問(wèn)是指酸性多糖整體的含量還是僅僅是指酸性多糖中糖醛酸部分的含量呢？比如下面這個(gè)多糖（結(jié)構(gòu)見(jiàn)下圖）以葡萄糖醛酸作標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后按照硫酸咔唑法的步驟測(cè)得這個(gè)多糖的吸光度A，通過(guò)曲線方程Y=aX+b，算出來(lái)的含量直接就是這個(gè)多糖的含量還是僅僅是這個(gè)多糖中葡萄糖醛酸的含量呢？求教！ 5.還有個(gè)問(wèn)題就是看有的文獻(xiàn)提到過(guò)在計(jì)算糖含量的時(shí)候，通過(guò)標(biāo)曲得到的結(jié)果好像并不是真實(shí)的結(jié)果，因?yàn)樗闷咸烟腔蛘咂咸烟侨┧岙?dāng)標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)曲反映出來(lái)的結(jié)果跟純的多糖當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)品是不一樣的，真實(shí)的結(jié)果應(yīng)該再這個(gè)的基礎(chǔ)上乘與一個(gè)換算系數(shù)，而這個(gè)換算系數(shù)通常是用純的多糖（或者已知純度的多糖）通過(guò)實(shí)驗(yàn)的測(cè)得的，那除了實(shí)驗(yàn)測(cè)得的話，請(qǐng)問(wèn)大家能不能通過(guò)多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)分析其單糖組成及其比例然后理論計(jì)算出其換算系數(shù)呢？可能不是很精確，但能否粗略得出呢？ 真誠(chéng)求教大家，希望可以互相交流，共同進(jìn)步！ |
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10pugongying
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 22.3
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- 在線: 2.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 3115873
7樓2014-05-23 16:53:59
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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樓主這個(gè)問(wèn)題很好，也很有深度。本人目前也在糾結(jié)這個(gè)問(wèn)題，衡量一個(gè)多糖的豐富到底是用糖醛酸還是用苯酚硫酸法測(cè)定的總糖來(lái)表示 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
8樓2016-05-19 01:10:13
簡(jiǎn)單回復(fù)
2012-07-14 10:46
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