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[求助]
求助 硫酸——苯酚法測多糖濃度
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求助！��！ 本人最近在做硫酸--苯酚法測多糖濃度，用葡萄糖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。苯酚用的是分析純的，可繪制出來的曲線那個(gè)歪啊。。。不知哪位大神做過這個(gè)實(shí)驗(yàn)，求指點(diǎn)啊 T{AAVAH$6NZ8WVZC0A_%V5M.jpg |
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【答案】應(yīng)助回帖
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. 5%苯酚溶液：取適量苯酚(A.R)，高溫蒸餾，收集180℃餾分，稱取50.0g，用水溶解，最后定容于1000m1棕色容量瓶中，冷藏避光保存。 . 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液(200mg/L)，精稱110℃恒重的葡萄糖20.0mg，用水溶解，定容至100m1。精密吸取2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 ml分別置于100ml量瓶中加水定容至刻度，搖勻得葡萄糖稀釋液。 . 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取上述各稀釋液2 ml置具塞試管中，同時(shí)精密量取水2.0 ml置另一具塞試管中，各管分別加5%苯酚溶液（新制）1 ml，搖勻，然后迅速加入濃硫酸5.0ml，立即搖勻，于40℃水浴中保溫30min，取出，置冷水浴中5 min。以上述2.0ml水所制得的空白溶液做參比，于490nm波長處測定各溶液吸收度，以葡萄糖稀釋液的濃度（μg/ml）為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 . 樣品的測定：吸取已定容的水解樣（必要時(shí)可稀釋到一定體積）2.0ml置于25ml比色管中，加5%苯酚試劑1.0ml，迅速滴加5.0ml濃硫酸，搖勻后在室溫下靜置30min；每個(gè)樣品做三個(gè)平行樣。于490nm處用空白調(diào)零測吸光度，然后代入標(biāo)準(zhǔn)曲線算出其總糖含量。 |
2樓2013-05-20 16:17:45
3樓2013-05-20 16:19:55
4樓2013-05-21 08:30:45
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