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hkxya7金蟲 (小有名氣)
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[求助]
菌株活化
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| 我用的菌在斜面培養(yǎng)基上已經(jīng)培養(yǎng)了接近八年的時間了,這株菌好像是一直保存在零下4度甘油中。我拿該菌劃平面還有液體培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)該菌還是長著很好的而且長著很快。所以我想問的是該菌還需不需要進(jìn)一步活化!請各位給點(diǎn)意見。。。。 |
木蟲 (正式寫手)
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菌種保藏實驗室大多用斜面和甘油管。一般斜面保藏方法應(yīng)該1-2月活化一次,而甘油管存于-20度和-80度是可以保藏數(shù)年的。 對于菌種的活化,如果是斜面,那么平板劃線或者接種液體培養(yǎng)基都o(jì)k。大多活化出現(xiàn)問題是在保藏的甘油管。因為甘油管一般多次拿出接菌,容易造成染菌。時間久也或多或少降低菌種活力,所以接種甘油管到液體培養(yǎng)基一般長得較平板會慢一些。 對于你的情況,個人建議因為存于4度,而且時間很久,最好用平板劃線多活化幾次,另外如有有抗性篩選,特異目的基因等的話,再進(jìn)行抗性篩選和基因PCR。如果是大腸保存質(zhì);虮磉_(dá)的,能夠提質(zhì)粒酶切鑒定自然是最好的?偟膩碚f,你的菌應(yīng)該多活化幾次同時鑒定一下。 |
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銀蟲 (小有名氣)
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不清楚你這個菌是不是需要發(fā)酵合成某種產(chǎn)物的?還是只是需要累積菌體? 如果是前者的話就要發(fā)酵一下看你產(chǎn)物的產(chǎn)量是否下降,或者連續(xù)傳幾代之后是否有產(chǎn)量下降的趨勢,如果出現(xiàn)這種情況就是需要活化了,而不是簡單的看菌體生長好壞。 建議每次劃線分離挑取活力最高的單菌落進(jìn)行活化菌種,這個對工業(yè)菌種很重要。 工業(yè)菌種的甘油管最好能保藏在-80度冰箱,如果是模式菌對產(chǎn)物產(chǎn)量沒要求保藏在-20度也可以。我們實驗室搞工業(yè)菌種很多,就是這么弄的。 |

木蟲 (小有名氣)
木蟲 (小有名氣)
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