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hkxya7金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
菌株活化
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| 我用的菌在斜面培養(yǎng)基上已經(jīng)培養(yǎng)了接近八年的時(shí)間了,這株菌好像是一直保存在零下4度甘油中。我拿該菌劃平面還有液體培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)該菌還是長(zhǎng)著很好的而且長(zhǎng)著很快。所以我想問(wèn)的是該菌還需不需要進(jìn)一步活化!請(qǐng)各位給點(diǎn)意見(jiàn)。。。。 |
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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不清楚你這個(gè)菌是不是需要發(fā)酵合成某種產(chǎn)物的?還是只是需要累積菌體? 如果是前者的話就要發(fā)酵一下看你產(chǎn)物的產(chǎn)量是否下降,或者連續(xù)傳幾代之后是否有產(chǎn)量下降的趨勢(shì),如果出現(xiàn)這種情況就是需要活化了,而不是簡(jiǎn)單的看菌體生長(zhǎng)好壞。 建議每次劃線分離挑取活力最高的單菌落進(jìn)行活化菌種,這個(gè)對(duì)工業(yè)菌種很重要。 工業(yè)菌種的甘油管最好能保藏在-80度冰箱,如果是模式菌對(duì)產(chǎn)物產(chǎn)量沒(méi)要求保藏在-20度也可以。我們實(shí)驗(yàn)室搞工業(yè)菌種很多,就是這么弄的。 |
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木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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菌種保藏實(shí)驗(yàn)室大多用斜面和甘油管。一般斜面保藏方法應(yīng)該1-2月活化一次,而甘油管存于-20度和-80度是可以保藏?cái)?shù)年的。 對(duì)于菌種的活化,如果是斜面,那么平板劃線或者接種液體培養(yǎng)基都o(jì)k。大多活化出現(xiàn)問(wèn)題是在保藏的甘油管。因?yàn)楦视凸芤话愣啻文贸鼋泳,容易造成染菌。時(shí)間久也或多或少降低菌種活力,所以接種甘油管到液體培養(yǎng)基一般長(zhǎng)得較平板會(huì)慢一些。 對(duì)于你的情況,個(gè)人建議因?yàn)榇嬗?度,而且時(shí)間很久,最好用平板劃線多活化幾次,另外如有有抗性篩選,特異目的基因等的話,再進(jìn)行抗性篩選和基因PCR。如果是大腸保存質(zhì);虮磉_(dá)的,能夠提質(zhì)粒酶切鑒定自然是最好的?偟膩(lái)說(shuō),你的菌應(yīng)該多活化幾次同時(shí)鑒定一下。 |
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