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jialemon新蟲(chóng) (初入文壇)
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[交流]
畢赤表達(dá)，有些有酶活無(wú)蛋白，有些有蛋白沒(méi)有酶活 已有5人參與
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| 最近用ppic9K和GS115做酶基因表達(dá)，挑取幾個(gè)菌落做甲醇誘導(dǎo)表達(dá)，48h取樣測(cè)酶活并跑SDS-PAGE，結(jié)果非常奇怪，有些沒(méi)有酶活但又條帶，但有些沒(méi)有酶活卻有目的蛋白條帶，不過(guò)也有正常的（有酶活有條帶）。有懂得能否指導(dǎo)一下，很糾結(jié)。 |
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-07-16 13:39:49
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-07-16 13:39:49
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有酶活沒(méi)蛋白： 1可能是有些蛋白表達(dá)量不高吧，所以SDSPAGE看不出來(lái)，但活性是有的。 2或者目標(biāo)蛋白沒(méi)有以預(yù)期大小表達(dá)出來(lái)，但酶活還是存在�？梢宰鰝�(gè)western試試。 有蛋白沒(méi)酶活： 1說(shuō)明這個(gè)蛋白容易失活，至少在你的試驗(yàn)條件下容易失活。 2可能蛋白活性需要某些輔酶，而異源表達(dá)情況下沒(méi)有。。。 |
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jialemon
4樓2012-07-15 13:20:28
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6樓2012-07-17 10:00:49
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7樓2012-07-17 10:48:04
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8樓2012-07-27 19:43:50
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9樓2012-07-27 19:44:15
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10樓2012-07-27 19:44:43
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