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soffy0214銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
今天提了一天的RNA，結(jié)果在紫外下只看到一團(tuán)黑色。求分析！
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我很確定我的rna是提出來(lái)了的。我用甲醛變性膠，加2微升EB，膠是紅色的。然后加10微升樣電泳，樣中加4微升甲醛，2微升上樣緩沖液，2微升10倍的MOPS緩沖液。檢測(cè)時(shí)什么都看不見(jiàn)，只在溴酚藍(lán)的位置看到一團(tuán)黑色的東西。A260和A280都是負(fù)值。我的RNA哪去了？求解！ [ Last edited by soffy0214 on 2012-7-19 at 08:24 ] |
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chenguestc
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-07-19 15:18:46
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| A260，280以及A260/280比值都可以用于分析RNA純度。你的值都是負(fù)的，說(shuō)明RNA降解了或沒(méi)有提出來(lái)。你提出的白色沉淀有可能只是組蛋白，一般提出RNA應(yīng)該是膠狀和管差不多顏色而非白色沉淀，或者你獲得的RNA量太多和部分蛋白沉淀在一起形成白色物，但是從你的A260，280值來(lái)看，是沒(méi)有提出來(lái)。白色的應(yīng)該是組蛋白，因?yàn)榻M蛋白溶解于水和稀酸。 |
6樓2012-07-19 10:09:10
2樓2012-07-19 08:38:47
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