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[求助]
關(guān)于堿法提質(zhì)粒時的問題
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| 最近做堿法提質(zhì)粒過程中，平衡酚被氧化了，成紅色，這對所提的質(zhì)粒有什么影響？瓊脂糖電泳出現(xiàn)的拖尾是否是由這造成的？不用酚，只用氯仿異戊醇可不可以？？請大家指教，謝謝~\(≧▽≦)/~啦啦啦�。。� |
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蝶舞清池4樓2012-07-20 09:05:46
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| 提質(zhì)粒時使用酚，主要目的是變性蛋白，但酚與水有一定互溶，因此需用水飽和酚。酚如果被氧化，容易降解DNA，樓主在電泳中看到的拖尾可能與此有關(guān)，粉紅色的酚不要使用了。由于氯仿本身也有變性蛋白作用，因此僅使用氯仿：異戊醇24:1也可以（我們實驗室就是用這種配方），抽提蛋白效果會有一點下降。 |
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2樓2012-07-19 22:54:35
nmhsd
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3樓2012-07-19 22:54:39
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5樓2012-07-20 09:49:15
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