 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 小片段雙酶切求助，急急急
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2135 | 回復: 18 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點擊這里進行查看 | |||
| 當前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
sxxuan金蟲 (著名寫手)
|
[求助]
小片段雙酶切求助，急急急
|
||
|
最近在做小片段載體的構建，目的片段只有60bp左右，已經(jīng)成功連接到pMD18-T中，需要雙酶切后連接到pET28a中，但是怎么切怎么連都是假陽性，怎么辦？ 附上雙酶切圖片，Takara 50bp的marker，感覺小片段好像被切散了，請大家?guī)兔鉀Q呀，都構建了兩個星期了，老大催得緊亞歷山大呀！ 雙酶切體系 質粒 30ul 酶 各1ul 10*buffer 5ul 100*BSA 0.5ul TE 12.5ul 37℃ 2h 割膠回收的最后一步30ul洗脫，連接 pET28a 1ul 小片段 7ul T4 ligase 1ul buffer 1ul |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有110人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
-
留學--博士招生
已經(jīng)有16人回復
-
化學工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復
-
湖北師范大學招調(diào)劑啦
已經(jīng)有6人回復
-
邵陽學院食品與化學工程學院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復
-
天津商業(yè)大學 生物與醫(yī)藥課題組招生
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求助：重組質粒酶切問題！請大家?guī)臀医鉀Q一下，急！
已經(jīng)有7人回復
- 【求助/交流】分步酶切 回收 求助
已經(jīng)有17人回復
- 分步酶切 回收 求助
已經(jīng)有1人回復
sd3824289
木蟲 (正式寫手)
- 應助: 47 (小學生)
- 金幣: 2304.1
- 散金: 33
- 帖子: 740
- 在線: 105.5小時
- 蟲號: 1657712
- 注冊: 2012-03-02
- 專業(yè): 生物化學
8樓2012-07-26 08:41:27
dshlove
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 17
- 應助: 237 (大學生)
- 金幣: 4764.7
- 散金: 20
- 紅花: 10
- 帖子: 852
- 在線: 419.2小時
- 蟲號: 1609389
- 注冊: 2012-02-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 污染控制化學
2樓2012-07-25 16:51:46
sxxuan
金蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 4
- 應助: 107 (高中生)
- 金幣: 3442.4
- 散金: 104
- 紅花: 17
- 帖子: 1478
- 在線: 266.1小時
- 蟲號: 512865
- 注冊: 2008-02-27
- 性別: MM
- 專業(yè): 生物化學
3樓2012-07-25 17:15:02
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
amisking: 金幣+2, MolEPI+1, 鼓勵發(fā)帖幫助解答問題。 2012-07-25 20:05:02
sxxuan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-07-26 16:41:25
感謝參與，應助指數(shù) +1
amisking: 金幣+2, MolEPI+1, 鼓勵發(fā)帖幫助解答問題。 2012-07-25 20:05:02
sxxuan: 金幣+5, ★★★很有幫助 2012-07-26 16:41:25
|
我之前也做過小片段 首先，酶切膠回收時候，用的試劑盒是那個呢？分辨率又是多少呢？可以分辨的最小片段是說少呢？如果量少，多P幾管效果會好點。 第二，載體上是否有你的酶切位點呢？一般酶的說明書上，會對小片段或者PCR產(chǎn)物有要求的。 第三，菌落PCR的引物，之前用的時候Tm與現(xiàn)在是否相同呢 希望對你有幫助 |
4樓2012-07-25 18:26:48
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料化工340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-30 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 270求調(diào)劑 +7 | 小杰pp 2026-03-31 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分，求調(diào)劑 +13 | 大饞小子 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 08工科275分求調(diào)劑 +13 | AaAa7420 2026-03-31 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學324求調(diào)劑 +12 | hanamiko 2026-03-27 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 339求調(diào)劑，想調(diào)回江蘇 +7 | 烤麥芽 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 26考研調(diào)劑 +3 | Wnz.20030617 2026-04-01 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 350求調(diào)劑 +7 | 阿佳～ 2026-03-31 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 288資源與環(huán)境專碩求調(diào)劑，不限專業(yè)，有學上就行 +25 | lllllos 2026-03-30 | 26/1300 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +3 | 321* 2026-03-31 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求化學調(diào)劑 +12 | wulanna 2026-03-28 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | 11ggg 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 297 地理學070500 復試求調(diào)劑 +3 | 小圓圈圈ooo 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +4 | GK72 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩 085600求調(diào)劑 +7 | BBQ233 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085701求調(diào)劑初試286分 +5 | secret0328 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學大學 ，080500材料科學與工程學碩 +6 | @taotao 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 11408軟件工程求調(diào)劑 +3 | Qiu學ing 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +8 | 邱gl 2026-03-27 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +5 | 哇盧卡庫 2026-03-26 | 5/250 |
|