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西區(qū)五號(hào)樓新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
昆蟲(chóng)DNA提取，沒(méi)結(jié)果��！
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| 用CTAB法提取一種蟲(chóng)子的DNA，結(jié)果好干凈��！除了MARKER什么都看不到��！已經(jīng)不是第一次這樣了��！但是沒(méi)有DNA的做PCR卻是有結(jié)果的，這是鬧哪樣啊！用異丙醇醇沉是不是不對(duì)�。窟�是我抽提的次數(shù)過(guò)多了呢？ |
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2樓2012-08-01 11:18:30
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-08-01 14:04:00
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流經(jīng)驗(yàn) 2012-08-01 14:04:00
| 你自己提取的話(huà)，很多試劑都是自己配制的，有時(shí)候不一定是哪個(gè)試劑出問(wèn)題，所以建議你把所有試劑換一下，或者你要是嫌麻煩的話(huà)，就換嫌疑最大的試劑，我以前做過(guò)CTAB提DNA，有一次就是因?yàn)門(mén)E buffer的pH出問(wèn)題導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)做不出來(lái)；或者你直接去買(mǎi)試劑盒得了，方便還便宜，省事；做PCR的時(shí)候可以考慮加陰性對(duì)照 |
3樓2012-08-01 11:23:35
西區(qū)五號(hào)樓
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4樓2012-08-01 14:05:00
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小丹木木: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-08-02 15:27:08
小丹木木: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2012-08-02 15:27:08
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樓主你意思是電泳看不到DNA條帶，但是PCR結(jié)果跑電泳能看到條帶是嗎？如果這樣，我建議，PCR設(shè)陰性對(duì)照，如果陰性對(duì)照沒(méi)有條帶而目的樣品出現(xiàn)條帶那應(yīng)該沒(méi)什么好擔(dān)心的。因?yàn)榄傊请娪井吘箾](méi)那么精確，很可能手提DNA量太少，在紫外下看不出來(lái)但能PCR出條帶。但你如果一定要在文章里要一張DNA的電泳圖，那... BTW我的經(jīng)驗(yàn)，試劑盒提取DNA質(zhì)量較手提純但濃度更低 |
7樓2012-08-02 08:49:22
ximenzoe
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8樓2012-08-02 17:53:19
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9樓2012-08-05 09:08:32
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