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...山雨新蟲 (初入文壇)
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[求助]
昆蟲基因組提取
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昆蟲基因組濃縮與純化： 1. 將樣品置于 1.5 mL 離心管中，在每一樣品中加入等體積的酚/氯仿/異戊醇溶液，將管中樣品振蕩混合成乳狀液體； 2. 室溫下，12000 r/min 離心 1 min； 3. 吸取上層水相層到另一潔凈的離心管中，再次加入等體積的酚/氯仿/異戊醇溶液，混勻，室溫下 12000 r/mi n離心 1 min； 4. 吸取上層水相轉(zhuǎn)移到另一潔凈離心管中，加入等體積的水飽和乙醚，混勻，靜置 5 min 待有機(jī)相與水相分層，棄上清乙醚； 5. 置于 68℃溫育 10 min，不時(shí)用手指彈動管壁，使乙醚充分揮發(fā)； 6. 加入 1/10 體積的乙酸鈉溶液（3 mol/L，pH5.2），上下顛倒離心管使溶液充分混勻； 7. 準(zhǔn)確加入 2 倍體積的預(yù)冷的無水乙醇，上下顛倒混勻，-20℃靜置 1 h使 DNA 充分沉淀； 8. 4℃，12000 r/min 離心 10 min，棄上清； 9. 加入 70% 預(yù)冷的乙醇至管中 2/3 體積，混勻漂洗以去除殘余的鹽，高速離心（4℃，12000 r/min，5 min），棄盡上清； 10. 室溫放置 15 min 左右，使乙醇完全揮發(fā)，加入適當(dāng)體積的雙蒸水或 TE 溶液重溶 DNA 沉淀。 請問：步驟中加入乙醚的具體作用？這步可以省略嗎？ |
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