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wanghd2826鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于RNA電泳~~~請高手指點(diǎn)
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| RNA電泳分變性和非變性的兩種，但是不知道在何種情況下運(yùn)用呢，我查了一些資料說變性的可以按分子量將RNA分開，貌似是比較精確的做法。我提取的是昆蟲的腹部總RNA，檢測完整度和純度的話，是用非變性的還是用變性的呢？請高指點(diǎn)啊，搜索了下沒有很明確的答案。 |
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西瓜
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
amisking(金幣+2, MolEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-17 20:18:52
amisking(金幣+2, MolEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-08-17 20:18:52
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光看這個(gè)的話非變性就可以了。就用普通的DNA瓊脂糖凝膠電泳的那套東東，100V，15分鐘就差不多了。 如果混有基因組DNA，會在靠近加樣孔的地方看到模糊條帶；完整度的話，主要看5s和18s（不知昆蟲是多少S  ）兩條亮帶，如果別降解了會看到拖尾。不過RNA各種大小都有，所以看到整個(gè)泳道模糊的一片是正常的，這個(gè)要跟拖尾現(xiàn)象區(qū)分開來哦。還有，雖然跟DNA電泳的東西一樣，但是最好弄一套跑RNA電泳專用的。實(shí)在沒有的話，跑RNA之前，把電泳槽的緩沖液換成新的，也OK。 |
2樓2011-08-17 13:07:01
wanghd2826
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3樓2011-08-17 14:53:48
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4樓2011-08-17 15:07:21
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5樓2011-08-17 17:12:03
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