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wanghd2826鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
關于RNA電泳~~~請高手指點
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| RNA電泳分變性和非變性的兩種,但是不知道在何種情況下運用呢,我查了一些資料說變性的可以按分子量將RNA分開,貌似是比較精確的做法。我提取的是昆蟲的腹部總RNA,檢測完整度和純度的話,是用非變性的還是用變性的呢?請高指點啊,搜索了下沒有很明確的答案。 |
【分子生物】EPI帖 |
鐵蟲 (小有名氣)
榮譽版主 (知名作家)
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光看這個的話非變性就可以了。就用普通的DNA瓊脂糖凝膠電泳的那套東東,100V,15分鐘就差不多了。 如果混有基因組DNA,會在靠近加樣孔的地方看到模糊條帶;完整度的話,主要看5s和18s(不知昆蟲是多少S )兩條亮帶,如果別降解了會看到拖尾。不過RNA各種大小都有,所以看到整個泳道模糊的一片是正常的,這個要跟拖尾現(xiàn)象區(qū)分開來哦。還有,雖然跟DNA電泳的東西一樣,但是最好弄一套跑RNA電泳專用的。實在沒有的話,跑RNA之前,把電泳槽的緩沖液換成新的,也OK。 |
榮譽版主 (知名作家)
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