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wanghd2826鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
關(guān)于RNA電泳~~~請(qǐng)高手指點(diǎn)
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| RNA電泳分變性和非變性的兩種,但是不知道在何種情況下運(yùn)用呢,我查了一些資料說(shuō)變性的可以按分子量將RNA分開(kāi),貌似是比較精確的做法。我提取的是昆蟲(chóng)的腹部總RNA,檢測(cè)完整度和純度的話(huà),是用非變性的還是用變性的呢?請(qǐng)高指點(diǎn)啊,搜索了下沒(méi)有很明確的答案。 |
【分子生物】EPI帖 |
榮譽(yù)版主 (知名作家)
榮譽(yù)版主 (知名作家)
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光看這個(gè)的話(huà)非變性就可以了。就用普通的DNA瓊脂糖凝膠電泳的那套東東,100V,15分鐘就差不多了。 如果混有基因組DNA,會(huì)在靠近加樣孔的地方看到模糊條帶;完整度的話(huà),主要看5s和18s(不知昆蟲(chóng)是多少S )兩條亮帶,如果別降解了會(huì)看到拖尾。不過(guò)RNA各種大小都有,所以看到整個(gè)泳道模糊的一片是正常的,這個(gè)要跟拖尾現(xiàn)象區(qū)分開(kāi)來(lái)哦。還有,雖然跟DNA電泳的東西一樣,但是最好弄一套跑RNA電泳專(zhuān)用的。實(shí)在沒(méi)有的話(huà),跑RNA之前,把電泳槽的緩沖液換成新的,也OK。 |
鐵蟲(chóng) (小有名氣)
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