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kunqian11新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
ELISA遇到問(wèn)題，向各位大俠請(qǐng)教
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各位大俠，小女子目前正在建立紫杉醇的ELISA檢測(cè)試劑盒。購(gòu)買了abcam的anti-taxol antibody，外包做紫杉醇-BSA偶聯(lián)（具體偶聯(lián)方法不清）。 用了兩種方式做紫杉醇檢測(cè)： 一是紫杉醇偶聯(lián)BSA后，包被、封閉，加入HRP標(biāo)記的紫杉醇抗體（稀釋倍數(shù)僅為200-300倍），加底物進(jìn)行顯色； 二是包被紫杉醇抗體，封閉，加HRP標(biāo)記的紫杉醇，加底物進(jìn)行顯色； 兩種試驗(yàn)測(cè)試的吸光度值均很低，且增大抗體或紫杉醇濃度后，吸光度值無(wú)明顯變化。 推測(cè)要么是抗體質(zhì)量有問(wèn)題，要么是我們的紫杉醇與BSA的偶聯(lián)方式影響了親和位點(diǎn)，導(dǎo)致抗體與紫杉醇親和力下降。但是具體怎么分析問(wèn)題的原因，又該采取什么方式進(jìn)行改進(jìn)呢？望各位大俠指點(diǎn)，不勝感激。 |
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kunqian115樓2012-08-08 18:17:28
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