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kunqian11新蟲 (初入文壇)
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[求助]
ELISA遇到問題,向各位大俠請教
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各位大俠,小女子目前正在建立紫杉醇的ELISA檢測試劑盒。購買了abcam的anti-taxol antibody,外包做紫杉醇-BSA偶聯(lián)(具體偶聯(lián)方法不清)。 用了兩種方式做紫杉醇檢測: 一是紫杉醇偶聯(lián)BSA后,包被、封閉,加入HRP標記的紫杉醇抗體(稀釋倍數(shù)僅為200-300倍),加底物進行顯色; 二是包被紫杉醇抗體,封閉,加HRP標記的紫杉醇,加底物進行顯色; 兩種試驗測試的吸光度值均很低,且增大抗體或紫杉醇濃度后,吸光度值無明顯變化。 推測要么是抗體質(zhì)量有問題,要么是我們的紫杉醇與BSA的偶聯(lián)方式影響了親和位點,導致抗體與紫杉醇親和力下降。但是具體怎么分析問題的原因,又該采取什么方式進行改進呢?望各位大俠指點,不勝感激。 |
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