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[求助]
液相分離兩個生物堿，分不開啊！
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| 用液相分兩個生物堿，一個是可可堿，一個是利血平，兩個分完全重疊，用甲醇：水（0.05%冰醋酸）=10:90流動相，我是剛剛開始做實驗，希望大家多多指教！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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soundhorizo: 金幣+3, 感謝應(yīng)助 ^^ 歡迎常來分析版 2012-08-09 00:08:30
408851978: 金幣+1 2012-08-09 21:20:57
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408851978: 金幣+1 2012-08-09 21:20:57
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結(jié)構(gòu)差異還挺大的，應(yīng)該很容易分開的。是用來分析還是制備？ 用你現(xiàn)在的流動相調(diào)，只是調(diào)梯度，基本上是沒什么希望了，試試看換不同的流動相，如加TFA，THF，TEA等，另外，做堿性化合物最好不要用甲醇，峰形不好，尤其是酸性和近中性條件下。 如果有耐堿的柱子，如XBridgeC18,可以嘗試堿性條件下分離，分離度和峰形都會有很大的改善。 如果想在酸性條件下做，又不想加特別復(fù)雜的添加劑，條件允許的話，可以試試一些特色柱，國內(nèi)的有些特色柱做的還不錯的，有個好像叫華譜的有這些柱子（我跟這公司沒關(guān)系，不帶推銷，只是用了一兩根，感覺還不錯） |
7樓2012-08-08 20:52:35
lzjessie_wlf
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【答案】應(yīng)助回帖
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reserpine: 弱堿性物質(zhì) Column : ODS column 2.0mm I.D. x 50 mmL Mobile phase A : 5mmol/L ammonium formate - water Mobile phase B : acetonitrile Gradient program : 20%B (0 min) 80%B (15 min) Flow rate : 0.2 mL/min Injection volume : 1 uL Column temperature : 40 deg. C 出峰時間大概為 12.25 min Theobromide， 堿性物質(zhì) 在弱堿性條件下 Zorbax Eclipse XDB-C8 column (4.6 150 mm i.d., 5-μm particle size) at 25°C, with a mobile phase of water–THF (0.1% THF in water, pH 8)–acetonitrile (90:10, v/v). The flow rate is 0.8 mL/min, and detection is by UV at 273 nm retention time of theobromide 3.25 min 1 1-methylxanthine 2 1,3-dimethyluric acid 3 3,7-dimethylxanthine theobromide 4 1,7-dimethylxanthine Column: ZORBAX SB-C18 (4.6X250, 5uM, rentention time 4.9 min) Mobile phase: A = 0.2% FA B = AcCN w 0.2% FA Isocratic composition: 98% A 2% B (v/v) Flow rate: 1.5 mL/min Injection volume: 2, 4, 6 μL, respectively Detector: DAD, 254 nm Flowcell: 3 μL, 2-mm flow path 希望這些條件可以幫助到你 |
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hytlovelm10樓2012-08-09 05:25:34
lihuan0525
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9樓2012-08-09 00:16:24
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