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[交流]
雙向電泳 超濾還是透析 已有2人參與
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各位雙向電泳的高手，我?guī)讉�關(guān)于樣品處理的問題想咨詢大家 1、雙向電泳對樣品濃度有要求嗎？我的大概是50mg/l 2、雙向電泳對樣品中的鹽要求高嗎？是絕對無鹽還是有一定閾值的呀？ 3、可以用超濾進行脫鹽嗎？超濾后有緩沖液洗脫還是直接用去離子水？如果用緩沖液的話，緩沖液也含鹽離子怎么辦？ 4、如果用透析，透析液用水還是緩沖液？緩沖液也是含鹽的呀？ 第一次做，實在不懂，望大家多多幫忙，謝謝！ |
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2樓2012-08-10 10:17:20
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝參與 2012-08-13 07:57:10
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
silicare: 金幣+3, BioEPI+1, 應(yīng)助指數(shù)+1, 謝謝參與 2012-08-13 07:57:10
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不是高手 1、雙向電泳對樣品濃度有要求嗎？我的大概是50mg/l 對濃度沒有要求，你可以參考第一相等點聚焦的上樣量進行考慮。第一相等點聚焦的上樣量可以去參看GE的固相等點聚焦產(chǎn)品手冊，不知道你的是打算跑什么pH范圍的，是3-11的還是4-7的？ 2、雙向電泳對樣品中的鹽要求高嗎？是絕對無鹽還是有一定閾值的呀？ 不要求無鹽，但是鹽離子濃度要低，因為鹽離子濃度太高電壓上不去，平衡的時間會很長，而且效果也不好 3、可以用超濾進行脫鹽嗎？超濾后有緩沖液洗脫還是直接用去離子水？如果用緩沖液的話，緩沖液也含鹽離子怎么辦？ 最好是用水吧，如果出于蛋白穩(wěn)定性考慮，需要采用緩沖液來穩(wěn)定pH值的，拿緩沖液鹽離子濃度低些也行。比如10mM之類的濃度，影響不大 4、如果用透析，透析液用水還是緩沖液？緩沖液也是含鹽的呀？ 這個同3 第一次做，實在不懂，望大家多多幫忙，謝謝！ |
4樓2012-08-10 16:30:35
5樓2012-08-11 14:36:30
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