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古木天恕木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
酵母DNA提取
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酵母DNA提取是有專(zhuān)門(mén)的DNA提取試劑盒還是用真菌的提取試劑盒也可以？ 或者用細(xì)菌的試劑盒也提的出來(lái)？ |
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古木天恕
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2樓2012-08-13 09:14:43
reallpf
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
scelab: 金幣+3, MicEPI+1, 謝謝熱心回復(fù)~ 2012-08-13 11:24:06
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scelab: 金幣+3, MicEPI+1, 謝謝熱心回復(fù)~ 2012-08-13 11:24:06
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個(gè)人經(jīng)驗(yàn)： 是有專(zhuān)門(mén)的酵母基因組提取試劑盒的。但是我一般都是自配試劑提基因組，效果很好，可用于檢測(cè)，PCR等，純度和濃度都很好。 附簡(jiǎn)步驟： 1.接菌培養(yǎng)，得菌體。 2.200uL lysis buffer（2% Triton X100，1%SDS，100mM NaCl，10mM Tris-HCl（pH8.0），1mM EDTA（pH8.0）重懸。 3.-80度2min，沸水浴1min，重復(fù)3次（越多越好）。 4.加200uL氯仿，重懸，12000rpm 2 min。 5.取上清加400uL冰預(yù)冷無(wú)水乙醇，得沉淀。 6.70%乙醇洗。 7.60度干燥。 8.溶于20uL 滅菌水。 |
3樓2012-08-13 10:02:42
tao666tao666
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4樓2012-08-15 07:12:57
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhang8826857: 金幣+2, 歡迎來(lái)微生物板塊交流 2012-09-08 17:04:41
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhang8826857: 金幣+2, 歡迎來(lái)微生物板塊交流 2012-09-08 17:04:41
| 你們做環(huán)境微生物的，估計(jì)做這方面試驗(yàn)不多，2樓的方法很好，但是有時(shí)候需要熟練和摸索，相對(duì)應(yīng)的，就是需要更多的時(shí)間和不斷重復(fù)。不如用試劑盒快捷，酵母基因組試劑盒這幾年已經(jīng)很多了，效果還不錯(cuò)。由于酵母細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，不建議跟細(xì)菌基因組或是真菌基因組試劑盒混用。有時(shí)候，酵母基因組試劑盒可以抽提細(xì)菌的，但反之，效果較差。有機(jī)會(huì)可以試一試的。 |
5樓2012-08-15 11:09:01
6樓2012-08-15 14:06:27
無(wú)疆@行者
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7樓2012-09-08 02:09:09
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