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jiangpeace鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
糖代謝 酶活試劑盒
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我做魚類糖代謝，大致有葡糖激酶(GK)、己糖激酶(HK)、葡萄糖脫氫酶(GDH)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)及丙酮酸激酶(PK）這幾種酶，文獻(xiàn)中好像都是自己配試劑測的，不知道是不是需要買試劑盒，一般用南京建成的比較多好像。如何選擇用哪幾種酶？ “上述測定結(jié)果用己糖激酶(HK, EC: 2·7·1·1)和葡萄糖脫氫酶(GDH, EC: 1·1·1·47)校正后的值為GK活性�！蔽墨I(xiàn)中都是這句話，不明白什么意思，還有括號里是什么意思？ |
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jiangpeace
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GK活性測定參照Tranul15，蔡春芳，蔣傳葵，高學(xué)軍等的方法(Tranul15MA etal，1996;蔡春芳，2004:蔣傳葵等，1982;高學(xué)軍等，2004)，反應(yīng)體系為:......。【上述測定結(jié)果以己糖激酶(HK)和葡萄糖脫氫酶(GDH)校正后的值為葡萄糖激酶(GK)活性值】。上法中葡萄糖水平改為0.5mM時(shí)所測值為己糖激酶(HK)值; 【上法中ATP去除所測值為葡萄糖脫氫酶(GDH)活性值】。各試管中分別加入lml反應(yīng)液，在25℃恒溫水浴中保溫3min以上，待溫度穩(wěn)定后分別加入40ul酶液(空白管不加酶液)，..... 請問上述【 】中的是什么意思？ |
4樓2012-08-18 14:59:42
jiangpeace
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2樓2012-08-17 09:43:36
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【答案】應(yīng)助回帖
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jiangpeace: 金幣+2, ★有幫助 2012-08-22 10:39:33
jiangpeace: 金幣+2, ★有幫助 2012-08-22 10:39:33
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建議你看這篇文獻(xiàn)，可以解決你的疑問為何要用GDH校正：《A Glucokinase-Like Enzyme in the Liver of Atlantic Salmon (Salmo Salar) 》，Michael A. Tranulis （1）體系加100mM葡萄糖和ATP時(shí)，所測的活力值為總HK（包括I,II,III,IV）和GDH的活力值，（2）體系加0.5mM葡萄糖和ATP時(shí)，所測的值為HK（包括I,II,III）的活力值——GK（HK IV）對葡萄糖Km值高，此時(shí)不反應(yīng)，（3）體系加100mM葡萄糖和不加ATP時(shí)，所測為GDH的活力值。 |
5樓2012-08-20 15:51:42
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