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zlfok00新蟲 (小有名氣)
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[求助]
LCMS對血漿樣品分析：低濃度樣品如何解決進樣量和樣品濃度的矛盾？
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血漿樣品采用二氯甲烷萃取，吹干復(fù)溶濃縮，現(xiàn)在在做標(biāo)準(zhǔn)曲線，成分是生物堿，檢測成分加內(nèi)標(biāo)一共7種。 前期摸索7種生物堿的色譜分離條件是采用高濃度（5mg/ml）低進樣量（0.5ul），得到良好分離效果，此濃度下進樣量提升到2ul以上便會出現(xiàn)過載現(xiàn)象。 現(xiàn)分析血漿樣品，濃度梯度從2000ng/ml至1ng/ml，此時無論如何調(diào)整進樣量，均得不到條件摸索時的分離效果。 本人剛接觸藥代方面，不知道做血漿成分分析的前輩們是怎么解決這個問題的？還望不吝賜教~ 謝謝！ 結(jié)果如下圖：標(biāo)準(zhǔn)曲線分析時，如果不進行EIC根本得不到良好結(jié)果，而EIC結(jié)果同樣不理想。 標(biāo)準(zhǔn)曲線中終濃度tic結(jié)果 任一成分EIC結(jié)果，舉例 |
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zlfok00
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3樓2012-08-20 09:00:30
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【答案】應(yīng)助回帖
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zlfok00: 金幣+2, ★★★很有幫助, 不好意思！最近忙著找房子，實驗都擱置了！ 2012-09-02 16:30:49
zlfok00: 金幣+2, ★★★很有幫助, 不好意思！最近忙著找房子，實驗都擱置了！ 2012-09-02 16:30:49
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一種辦法就是增大樣品量，比如之前用100uL血漿，現(xiàn)在用200或300，然后揮干至較小體積，增加樣品濃度。 另一種就是重新摸索梯度，看你的保留時間才1min，也太早了點�？梢哉{(diào)一下流動相pH往堿性一些，保留時間會往后，分離度應(yīng)該會好一些。只要你的柱子能耐受，可以用waters BEH，pH可以調(diào)到12。便宜一些的菲羅門應(yīng)該也有很好的能耐堿性的柱子，你可以去查一下 |
4樓2012-08-20 14:36:06
zlfok00
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5樓2012-09-02 16:38:57
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