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windleakey金蟲 (小有名氣)
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[求助]
SDS PAGE 小肽？
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大家好： 由于以前對(duì)小肽不了解，所以跑電泳遇到了問題，下面是我的電泳圖，Marker最小的帶是14kd，我的蛋白是5kd多，我的問題是，小肽超過了分離膠的分辨范圍，是完全不會(huì)顯示條帶嗎？換一種說(shuō)法就是，單憑我的圖是否能確定我的蛋白有沒有誘導(dǎo)出來(lái)嗎？我轉(zhuǎn)化用的是畢赤酵母，所以沒什么分泌雜蛋白。 希望有大神能幫我。。。另外有關(guān)于小肽電泳的資料（Tricine sds page之類的），希望發(fā)我一份，謝謝了 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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同意樓上說(shuō)法，你可以用45%的丙烯酰胺，然后跑tricine膠 專門跑10KD以下的蛋白 效果較好 參考http://www.nature.com/nprot/journal/v1/n1/full/nprot.2006.4.html |
8樓2012-08-24 09:09:51
wizardfan
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4樓2012-08-22 17:42:23
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5樓2012-08-23 05:58:57
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6樓2012-08-24 08:03:54
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7樓2012-08-24 08:04:20
★ ★
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖！ 2012-09-04 17:41:14
yqbter: 金幣+2, 鼓勵(lì)發(fā)帖！ 2012-09-04 17:41:14
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不是做LC-MS，我那天說(shuō)的意思是：是先做HPLC分析一下，看看里面的情況，可不可以純化一下再做MALDI-TOF，另外MALDI-TOF是不可以和LC連用的，ESI什么的是可以喝LC連用，所以叫LC-MS，而MALDI-TOF是要和基質(zhì)一起結(jié)晶到靶上，然后用激光輔助電離的，而且5KD的分子量走HPLC沒什么問題 或者說(shuō)是LC-MS也行，基本上就是給你做成多電荷峰，也就是說(shuō)是1/3峰，1/4峰，這樣的話你在算回去就行了 |
9樓2012-08-24 13:39:24
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10樓2012-08-24 16:53:29
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