 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2012 | 回復(fù): 6 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[求助]
特異性Promoter引物該怎么設(shè)計(jì)啊
|
|||
|
小弟想請(qǐng)教各位高賢大仙一個(gè)關(guān)于Promoter引物設(shè)計(jì)的問題。 我想把在某一種細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因的Promoter擴(kuò)增出來，然后連接在適當(dāng)?shù)妮d體上并加上標(biāo)記蛋白和熒光蛋白的表達(dá)序列，使這些目的蛋白依據(jù)Promoter的特異性表達(dá)在這種細(xì)胞中。但是小弟之前沒有做過Promoter引物的設(shè)計(jì)，據(jù)說涉及到5‘UTR端的長(zhǎng)度等問題，希望各路高人指點(diǎn)一二，不勝感激。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有99人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 大家做RT-qPCR設(shè)計(jì)引物用的什么軟件呀？
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 引物設(shè)計(jì)好了怎么檢測(cè)它的特異性
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 引物設(shè)計(jì)的問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】怎樣設(shè)計(jì)目的基因的引物
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】（引物設(shè)計(jì)）怎么防止pET28a中Nco1的ATG影響目的基因的表達(dá)？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】求助：如何設(shè)計(jì)種屬特異性引物？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 引物設(shè)計(jì)時(shí)總是發(fā)生嚴(yán)重錯(cuò)配怎么辦？敬請(qǐng)大家指點(diǎn)！
已經(jīng)有3人回復(fù)
|
你好，多謝你的回答。 我在文獻(xiàn)上查到某個(gè)基因的promoter時(shí)這么說“Reporter gene assay: [str-1::gfp] translational fusion, with 4 kb 5'UTR of str-1 and the first 4 amino acids of the protein.” 請(qǐng)問4kb 5'UTR of str-1 是從str-1 的5' CDS區(qū)起始密碼子往前算4kb（就是包括了5'UTR ），還是從 5'UTR之前往前算4kb（就是不包括5'UTR ）？還有，那個(gè)“the first 4 amino acids of the protein”怎么解釋？ 非常感謝！ |
5樓2012-08-24 10:25:49
tiani_tan
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 30 (小學(xué)生)
- 金幣: 1251.7
- 散金: 5
- 紅花: 3
- 帖子: 266
- 在線: 139小時(shí)
- 蟲號(hào): 803661
- 注冊(cè): 2009-07-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 蔬菜學(xué)與瓜果學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 七夕這么有空，積極鼓勵(lì) 2012-08-23 15:52:30
張虎: 金幣+5, ★有幫助 2012-08-24 09:35:05
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 七夕這么有空，積極鼓勵(lì) 2012-08-23 15:52:30
張虎: 金幣+5, ★有幫助 2012-08-24 09:35:05
| 啟動(dòng)子的擴(kuò)增，模板是基因組DNA，需要將基因組DNA酶切后連上接頭，以一個(gè)接頭的序列為引物，目的基因內(nèi)部序列為另一側(cè)的引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，有點(diǎn)類似于RACE，你可以參考一下文獻(xiàn)，或者購買相關(guān)的試劑盒��！祝好運(yùn)！ |
2樓2012-08-23 12:26:59
3樓2012-08-23 13:07:56
tiani_tan
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 30 (小學(xué)生)
- 金幣: 1251.7
- 散金: 5
- 紅花: 3
- 帖子: 266
- 在線: 139小時(shí)
- 蟲號(hào): 803661
- 注冊(cè): 2009-07-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 蔬菜學(xué)與瓜果學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
張虎: 金幣+15, ★★★★★最佳答案 2012-08-24 09:35:55
張虎: 金幣+15, ★★★★★最佳答案 2012-08-24 09:35:55
|
首先，確定你的物種是否已經(jīng)被報(bào)道，如果基因組已經(jīng)知道的話，那么根據(jù)網(wǎng)上的序列設(shè)計(jì)引物，這里需要注意的是分析啟動(dòng)子最低片段是多少；含有順式作用原件的區(qū)域有多長(zhǎng)；含有增強(qiáng)子的序列有多少，可能最后需要獲得幾條大小不同的片段，需要構(gòu)建幾個(gè)載體，一一驗(yàn)證。 對(duì)于基因組未曾報(bào)道的序列，就比較復(fù)雜。就像我上文說的，需要用一些限制性內(nèi)切酶將基因組酶切成小片段后，連接接頭，然后利用接頭上的一直序列和基因內(nèi)部序列進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后測(cè)序，根據(jù)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行啟動(dòng)子預(yù)測(cè)，然后擴(kuò)增含有不同區(qū)域的引物，驗(yàn)證功能。 建議還是搜集一下相關(guān)文獻(xiàn)，我只是看過文獻(xiàn)，實(shí)驗(yàn)室有人做過這方面的。但我自己沒有做過。呵呵�。� |
4樓2012-08-24 09:05:24
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +21 | rare12345 2026-03-18 | 21/1050 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0856調(diào)劑，是學(xué)校就去 +8 | sllhht 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 本人考085602 化學(xué)工程 專碩 +18 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 20/1000 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +4 | 申子申申 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +5 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑 +7 | 為學(xué)666 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-16 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 354求調(diào)劑 +4 | Tyoumou 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +6 | 26研0 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 收復(fù)試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +4 | 張vvvv 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調(diào)劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八6八68 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +3 | 劉夢(mèng)微 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求老師收留調(diào)劑 +4 | jiang姜66 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調(diào)劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|