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000002銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
枯草芽孢桿菌的染色實驗
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請教各位老師：我想用染色法在顯微鏡下觀察枯草芽孢桿菌的菌體和芽孢的形態(tài)，尋求具體的實驗操作過程及染色方法，以前實驗課沒有學(xué)到這部分。 染色的是菌液，還是菌苔，活菌還是失死的，在多少倍顯微鏡下可以清晰看到。染色必須有染色和脫色過程嗎，有沒有什么染料滴到長滿芽孢桿菌的固體培養(yǎng)基上就可以使芽孢桿菌著色？ 謝謝， 請賜教 |
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weiyasong
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芽孢桿菌染色可以用革蘭氏染色和芽孢染色。至于菌液菌苔都可以，菌液直接在載玻片上涂抹，菌苔需要先在載玻片上滴加無菌生理鹽水進行涂菌。干燥，固定，然后進行染色；具體是：（1）革蘭氏染色：草酸銨結(jié)晶紫1-2min，革蘭氏碘液1-2min，95%30s-1min，沙黃染液或者石炭酸復(fù)紅30s，吸干或自然干燥，然后鏡檢（可以先低倍鏡找視野，高倍鏡觀察，油鏡看）。革蘭氏陽性菌為藍紫色，革蘭氏陰性菌成粉紅色，可見芽孢無色。（2）芽孢染色：有2種①復(fù)紅美蘭染色法：在固定好的載玻片上滴加石炭酸復(fù)紅，加熱至產(chǎn)生蒸汽，2-3min，水洗。以5%醋酸脫色，至淡紅色為止，水洗。以駱（呂）氏美藍液復(fù)染0.5min，水洗，吸干鏡檢。②孔雀綠染色法：在固定好的載玻片上滴加飽和的孔雀綠水溶液（7.6%）10min，水洗，用0.5%番紅液或者沙黃液復(fù)染0.5min，水洗，鏡檢（同革蘭氏染色法）。結(jié)果芽孢成綠色，菌體成粉紅色。 至于在培養(yǎng)基上加染液看芽孢菌的，沒做過，不太清楚…… |
2樓2012-08-29 09:56:20
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