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000002銀蟲 (小有名氣)
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[求助]
枯草芽孢桿菌的染色實驗
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請教各位老師:我想用染色法在顯微鏡下觀察枯草芽孢桿菌的菌體和芽孢的形態(tài),尋求具體的實驗操作過程及染色方法,以前實驗課沒有學到這部分。 染色的是菌液,還是菌苔,活菌還是失死的,在多少倍顯微鏡下可以清晰看到。染色必須有染色和脫色過程嗎,有沒有什么染料滴到長滿芽孢桿菌的固體培養(yǎng)基上就可以使芽孢桿菌著色? 謝謝, 請賜教 |
木蟲 (著名寫手)
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芽孢桿菌染色可以用革蘭氏染色和芽孢染色。至于菌液菌苔都可以,菌液直接在載玻片上涂抹,菌苔需要先在載玻片上滴加無菌生理鹽水進行涂菌。干燥,固定,然后進行染色;具體是:(1)革蘭氏染色:草酸銨結(jié)晶紫1-2min,革蘭氏碘液1-2min,95%30s-1min,沙黃染液或者石炭酸復(fù)紅30s,吸干或自然干燥,然后鏡檢(可以先低倍鏡找視野,高倍鏡觀察,油鏡看)。革蘭氏陽性菌為藍紫色,革蘭氏陰性菌成粉紅色,可見芽孢無色。(2)芽孢染色:有2種①復(fù)紅美蘭染色法:在固定好的載玻片上滴加石炭酸復(fù)紅,加熱至產(chǎn)生蒸汽,2-3min,水洗。以5%醋酸脫色,至淡紅色為止,水洗。以駱(呂)氏美藍液復(fù)染0.5min,水洗,吸干鏡檢。②孔雀綠染色法:在固定好的載玻片上滴加飽和的孔雀綠水溶液(7.6%)10min,水洗,用0.5%番紅液或者沙黃液復(fù)染0.5min,水洗,鏡檢(同革蘭氏染色法)。結(jié)果芽孢成綠色,菌體成粉紅色。 至于在培養(yǎng)基上加染液看芽孢菌的,沒做過,不太清楚…… |
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