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zlyshandon木蟲 (正式寫手)
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[求助]
雙向電泳總是有條紋。
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如圖，總是有條紋在，丙酮（-20沉淀兩小時），TCA(15%)沉淀都會有這個問題，一向在升壓過程 中沒有什么問題，電流也不會太大。是霉菌的胞內(nèi)蛋白，沉淀后的蛋白濃度大概是2.5mg/ml的樣子。 1、24cm的膠條多少的上樣量合適？我上的是600微克。 2、樣品處理為先1：1的濕菌體和玻璃珠混合后液氮研磨，再用minibeads beater間歇破碎10min(30s破碎30s冰浴)。離心后取上清沉淀。染色是膠體考染。第一次做的時候染色完成后蛋白點比較清晰，但是用超純水脫色后就變成了條帶狀，不知道是為什么？有人遇到過這種情況嗎？ 做了好久了都是有條紋，希望哪位大俠給指導(dǎo)下，可以追加金幣的，只要能把問題解決了。謝謝！ 1.jpg |
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zlyshandon
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5樓2013-05-21 09:13:20
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