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engoy-vip木蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
測(cè)多糖的分子量
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| 有沒(méi)有哪位朋友做過(guò)，用葡聚糖做標(biāo)準(zhǔn)品做，高效凝膠色譜測(cè)多糖的分子量的？這個(gè)葡聚糖標(biāo)準(zhǔn)品是選的多大分子量的？ 價(jià)格上，是不是分子量越大的標(biāo)準(zhǔn)品越貴？ 我的樣品是植物多糖。 |
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多糖的分子量與分子量分布測(cè)定法 藥品名稱 多糖的分子量與分子量分布測(cè)定法 類別 原料藥 全文 多糖的分子量與分子量分布是用高效液相色譜法（中國(guó)藥典1995年版二部附錄ⅤＤ）測(cè)定。 1.對(duì)儀器的一般要求所用儀器為高效液相色譜儀。 色譜柱為測(cè)多糖專用凝膠柱，根據(jù)所測(cè)樣品的分子量大小選擇特定排阻范圍的凝膠柱。 檢測(cè)器為示差折光檢測(cè)器單用，有時(shí)亦可與紫外檢測(cè)器聯(lián)用。 2.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)按各品種項(xiàng)下要求對(duì)儀器進(jìn)行適用性試驗(yàn)，規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的最小理論板數(shù)(n)和供試品在該分析狀態(tài)下的分配系數(shù)(Kd)應(yīng)達(dá)到規(guī)定的要求�！ �(1)n=5.54(t<[R]>/W<[h/2]>  <2> (2)K<[d]>=t<[R]>－t0/tT－t0 式中 W<[h/2]>為半峰寬；t<[R]>為供試品峰的保留時(shí)間，用于測(cè)柱效時(shí)，指葡萄糖峰的保留時(shí)間；t0為完全被填料顆粒網(wǎng)孔排阻的大分子的保留時(shí)間，一般指藍(lán)色葡聚糖的保留時(shí)間；tT為能自由進(jìn)出填料顆粒網(wǎng)孔的小分子的保留時(shí)間，一般指葡萄糖的保留時(shí)間。 3.測(cè)定法 (1)系統(tǒng)校正 根據(jù)供試品分子量大小，一般選用5個(gè)已知分子量的多糖標(biāo)準(zhǔn)品（常用的為葡聚糖dextran），分別用流動(dòng)相溶解制成每1ml中約含10mg的溶液，分別注入25μl標(biāo)準(zhǔn)品溶液，記錄示差色譜圖�！ ∮蒅PC專用軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線�！ 【�性回歸方程為：logM<[w]>＝a＋bRT式中 M<[w]>為標(biāo)樣的已知重均分子量；RT為標(biāo)樣的保留時(shí)間�！ �(2)樣品測(cè)量 注入25μl供試品溶液，記錄示差色譜圖，分子量計(jì)算如下： Mn＝ΣRI<>/Σ(RI<>/M<>Mw＝Σ(RI<>M<>/ΣRI<>D＝Mw/Mn 式中 Mn為數(shù)均分子量；RIi為樣品i級(jí)分的物質(zhì)量，即示差色譜圖的峰高；Mi為樣品i級(jí)分的分子量，即示差色譜圖I時(shí)間點(diǎn)代入標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得的分子量。 4.結(jié)果處理采用GPC專用軟件，可獲得樣品歸一化色譜圖，微分、積分分子量分布圖,各時(shí)間點(diǎn)的分子量(片斷數(shù)據(jù))和各種平均分子量�！ 「鶕�(jù)供試品需要選擇各項(xiàng)測(cè)定結(jié)果。 |
5樓2012-09-13 22:22:01
396101466
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2樓2012-09-12 11:59:34
engoy-vip
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3樓2012-09-12 14:25:55
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lovibond: 亂碼 2012-09-13 08:31:06
| 具體的我沒(méi)有???過(guò)，但是我們這邊有人???，所以了解一些??你???以看看這個(gè)帖??：http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=2892734 |
4樓2012-09-12 14:36:51
liweixiaoye
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6樓2012-09-14 19:56:17
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7樓2012-09-16 14:49:43
liweixiaoye
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