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greenhope3371銅蟲 (正式寫手)
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[交流]
實(shí)時(shí)定量模板統(tǒng)一量是提材料 or RNA初始量 or 反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 已有5人參與
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1、實(shí)時(shí)定量模板統(tǒng)一量是提RNA的組織材料量一樣還是RNA初始量一樣，還是反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 第二個(gè)問題，三重復(fù)是加樣的重復(fù)，還是不同模板PCR的重復(fù)？ 歡迎熱烈討論，共同提高！ 先說我們自己的是RNA初始量一致，然后反轉(zhuǎn)錄； 另外三重復(fù)是每板PCR中每個(gè)PCR三次加樣重復(fù)，當(dāng)然還需另外做不同模板PCR重復(fù) |
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atlanticwi
金蟲 (正式寫手)
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵分享經(jīng)驗(yàn) 2012-09-28 14:48:18
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵分享經(jīng)驗(yàn) 2012-09-28 14:48:18
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嗯................. 我們的做法是 1. 統(tǒng)一的樣品量，保證提出了的一樣的基因，我們老板認(rèn)為不同的初始樣品量可能會導(dǎo)致小樣品量的可能提不出某些低表達(dá)量基因，所以會有平行誤差。 2. RNA提取完成后按照濃度值上統(tǒng)一的模板量做RT 3. cDNA沒有有效方法測定統(tǒng)一量，所以一般普遍認(rèn)定同樣量RT出來的都是同樣量cDNA。 關(guān)于重復(fù)的東西請見偶的帖子：我在里邊闡述咯，請移步 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4318668 個(gè)人看法 若有說錯(cuò)請高手指點(diǎn)  |
4樓2012-09-28 12:37:29
gwd0312
木蟲 (正式寫手)
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2樓2012-09-28 11:28:15
chenguestc
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3樓2012-09-28 12:13:07
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5樓2012-09-28 15:19:07
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