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greenhope3371銅蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
實(shí)時(shí)定量模板統(tǒng)一量是提材料 or RNA初始量 or 反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 已有5人參與
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1、實(shí)時(shí)定量模板統(tǒng)一量是提RNA的組織材料量一樣還是RNA初始量一樣，還是反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 第二個(gè)問(wèn)題，三重復(fù)是加樣的重復(fù)，還是不同模板PCR的重復(fù)？ 歡迎熱烈討論，共同提高！ 先說(shuō)我們自己的是RNA初始量一致，然后反轉(zhuǎn)錄； 另外三重復(fù)是每板PCR中每個(gè)PCR三次加樣重復(fù)，當(dāng)然還需另外做不同模板PCR重復(fù) |
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joan198108
鐵桿木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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5樓2012-09-28 15:19:07
gwd0312
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2樓2012-09-28 11:28:15
chenguestc
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3樓2012-09-28 12:13:07
atlanticwi
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)分享經(jīng)驗(yàn) 2012-09-28 14:48:18
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵(lì)分享經(jīng)驗(yàn) 2012-09-28 14:48:18
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嗯................. 我們的做法是 1. 統(tǒng)一的樣品量，保證提出了的一樣的基因，我們老板認(rèn)為不同的初始樣品量可能會(huì)導(dǎo)致小樣品量的可能提不出某些低表達(dá)量基因，所以會(huì)有平行誤差。 2. RNA提取完成后按照濃度值上統(tǒng)一的模板量做RT 3. cDNA沒(méi)有有效方法測(cè)定統(tǒng)一量，所以一般普遍認(rèn)定同樣量RT出來(lái)的都是同樣量cDNA。 關(guān)于重復(fù)的東西請(qǐng)見(jiàn)偶的帖子：我在里邊闡述咯，請(qǐng)移步 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4318668 個(gè)人看法 若有說(shuō)錯(cuò)請(qǐng)高手指點(diǎn)  |
4樓2012-09-28 12:37:29
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