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greenhope3371銅蟲 (正式寫手)
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[交流]
實時定量模板統(tǒng)一量是提材料 or RNA初始量 or 反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 已有5人參與
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1、實時定量模板統(tǒng)一量是提RNA的組織材料量一樣還是RNA初始量一樣，還是反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣？ 第二個問題，三重復是加樣的重復，還是不同模板PCR的重復？ 歡迎熱烈討論，共同提高！ 先說我們自己的是RNA初始量一致，然后反轉(zhuǎn)錄； 另外三重復是每板PCR中每個PCR三次加樣重復，當然還需另外做不同模板PCR重復 |
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gwd0312
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2樓2012-09-28 11:28:15
chenguestc
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3樓2012-09-28 12:13:07
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵分享經(jīng)驗 2012-09-28 14:48:18
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小丹木木: 金幣+3, 鼓勵分享經(jīng)驗 2012-09-28 14:48:18
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嗯................. 我們的做法是 1. 統(tǒng)一的樣品量，保證提出了的一樣的基因，我們老板認為不同的初始樣品量可能會導致小樣品量的可能提不出某些低表達量基因，所以會有平行誤差。 2. RNA提取完成后按照濃度值上統(tǒng)一的模板量做RT 3. cDNA沒有有效方法測定統(tǒng)一量，所以一般普遍認定同樣量RT出來的都是同樣量cDNA。 關于重復的東西請見偶的帖子：我在里邊闡述咯，請移步 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4318668 個人看法 若有說錯請高手指點  |
4樓2012-09-28 12:37:29
joan198108
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6樓2012-09-28 15:22:13
greenhope3371
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7樓2012-10-02 22:29:23
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