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greenhope3371銅蟲 (正式寫手)
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[交流]
實時定量模板統(tǒng)一量是提材料 or RNA初始量 or 反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣? 已有5人參與
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1、實時定量模板統(tǒng)一量是提RNA的組織材料量一樣還是RNA初始量一樣,還是反轉(zhuǎn)錄后的cDNA量一樣? 第二個問題,三重復(fù)是加樣的重復(fù),還是不同模板PCR的重復(fù)? 歡迎熱烈討論,共同提高! 先說我們自己的是RNA初始量一致,然后反轉(zhuǎn)錄; 另外三重復(fù)是每板PCR中每個PCR三次加樣重復(fù),當然還需另外做不同模板PCR重復(fù) |

銅蟲 (正式寫手)

木蟲 (正式寫手)
“無冕之王”

木蟲 (職業(yè)作家)
金蟲 (正式寫手)
琴美喜歡發(fā)呆 不喜歡發(fā)脾氣
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嗯................. 我們的做法是 1. 統(tǒng)一的樣品量,保證提出了的一樣的基因,我們老板認為不同的初始樣品量可能會導(dǎo)致小樣品量的可能提不出某些低表達量基因,所以會有平行誤差。 2. RNA提取完成后按照濃度值上統(tǒng)一的模板量做RT 3. cDNA沒有有效方法測定統(tǒng)一量,所以一般普遍認定同樣量RT出來的都是同樣量cDNA。 關(guān)于重復(fù)的東西請見偶的帖子:我在里邊闡述咯,請移步 http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=4318668 個人看法 若有說錯請高手指點 |

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