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review銀蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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如何設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增片段？做克隆的
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已知 cdna序列和cds序列。 想設(shè)計(jì)引物：pcr擴(kuò)增片段---回收片段，加A---與載體連接----轉(zhuǎn)化--提質(zhì)粒等 請(qǐng)問(wèn)如何設(shè)計(jì)引物？是不是還要找到cds的 起始密碼 終止密碼之類(lèi)？ 誰(shuí)能詳細(xì)告訴我？初學(xué)者的困惑很痛苦啊 |
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銀蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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5樓2012-09-29 16:18:26
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3樓2012-09-29 15:28:58
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| 是用sdna序列就可以了，加A需使用還有加A酶功能的dna擴(kuò)增酶，有些酶擴(kuò)增出來(lái)是不加A的，另外擴(kuò)增后你可以直接連接到表達(dá)載體上就不需要加A了，另外起始密碼和終止密碼你一般最好含在里面，因?yàn)橛行┹d體是不含有atg啟動(dòng)子和終止密碼子的，但大多都是含有的，你帶上了也不影響，所以最好帶著。 |
4樓2012-09-29 15:49:21
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