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review銀蟲 (著名寫手)
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[求助]
如何設(shè)計引物擴(kuò)增片段？做克隆的
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已知 cdna序列和cds序列。 想設(shè)計引物：pcr擴(kuò)增片段---回收片段，加A---與載體連接----轉(zhuǎn)化--提質(zhì)粒等 請問如何設(shè)計引物？是不是還要找到cds的 起始密碼 終止密碼之類？ 誰能詳細(xì)告訴我？初學(xué)者的困惑很痛苦啊 |
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123n
木蟲 (正式寫手)
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3樓2012-09-29 15:28:58
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【答案】應(yīng)助回帖
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| 是用sdna序列就可以了，加A需使用還有加A酶功能的dna擴(kuò)增酶，有些酶擴(kuò)增出來是不加A的，另外擴(kuò)增后你可以直接連接到表達(dá)載體上就不需要加A了，另外起始密碼和終止密碼你一般最好含在里面，因?yàn)橛行┹d體是不含有atg啟動子和終止密碼子的，但大多都是含有的，你帶上了也不影響，所以最好帶著。 |
4樓2012-09-29 15:49:21
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