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stonesby新蟲 (初入文壇)
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[求助]
構(gòu)建GFP融合基因時(shí)，如何設(shè)計(jì)帶限制性內(nèi)切酶的引物
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構(gòu)建GFP融合基因，目的基因放GFP前面，需要去除終止密碼子，具體如何去除？帶限制性內(nèi)切酶的引物如何設(shè)計(jì)？新手剛接觸，請(qǐng)指教，謝謝 |
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gwd0312
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone: 回帖置頂 2012-10-10 16:29:34
1949stone: MolEPI+1, 很有指導(dǎo)意義 2012-10-10 16:29:53
1949stone: 回帖置頂 2012-10-10 16:29:34
1949stone: MolEPI+1, 很有指導(dǎo)意義 2012-10-10 16:29:53
| 如果你是手動(dòng)設(shè)計(jì)引物就直接將終止密碼子去掉，然后在終止密碼子前面選取18-21個(gè)堿基，再反向互補(bǔ)就是下游引物了。將選擇好的內(nèi)切酶（既要保證能切下來(lái)還要能連接上去）加上保護(hù)堿基直接放到設(shè)計(jì)好的引物序列上就OK了。切記方向不要弄反了！ |
2樓2012-10-10 10:40:47
stonesby
新蟲 (初入文壇)
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3樓2012-10-20 09:32:22
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