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summergca銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于衛(wèi)星菌落
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最近在做轉(zhuǎn)化，感受態(tài)用的是Top 10，質(zhì)粒a是Amp抗性（濃度100ug/ul），在37℃，過(guò)夜培養(yǎng)，大概13小時(shí)左右，有衛(wèi)星菌落； 后來(lái)增加Amp濃度，150ug/ul，同樣培養(yǎng)條件，還是有衛(wèi)星菌落生長(zhǎng)； 用pUC18、pUC19轉(zhuǎn)化的時(shí)候，沒(méi)有衛(wèi)星菌落 Amp是索來(lái)寶的，質(zhì)粒a是老師自己構(gòu)建的，他說(shuō)是抗生素問(wèn)題…… 大神們幫我分析分析吧~ |
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2樓2012-10-15 10:13:33
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-10-16 13:45:14
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| 如果構(gòu)建的載體沒(méi)有問(wèn)題，出現(xiàn)衛(wèi)星菌落一般考慮一下幾個(gè)方面：一是抗生素出了問(wèn)題；二是操作出了問(wèn)題�？股胤胖脮r(shí)間過(guò)長(zhǎng)或者溫度過(guò)高，也可能是紫外線燈因素影響，會(huì)出現(xiàn)失效的可能。在加氨芐的平板上涂布菌液時(shí)，可能由于氨芐濃度太低或者局部菌液太多，出現(xiàn)衛(wèi)星菌落情況。如果以上所有問(wèn)題都已經(jīng)排除還是出現(xiàn)衛(wèi)星菌落，建議挑去衛(wèi)星菌落中間較大的菌落，成功率也還是比較高的。 |
9樓2012-10-16 08:28:50
xl0071334
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10樓2012-10-16 20:19:56
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