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summergca銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于衛(wèi)星菌落
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最近在做轉(zhuǎn)化,感受態(tài)用的是Top 10,質(zhì)粒a是Amp抗性(濃度100ug/ul),在37℃,過夜培養(yǎng),大概13小時左右,有衛(wèi)星菌落; 后來增加Amp濃度,150ug/ul,同樣培養(yǎng)條件,還是有衛(wèi)星菌落生長; 用pUC18、pUC19轉(zhuǎn)化的時候,沒有衛(wèi)星菌落 Amp是索來寶的,質(zhì)粒a是老師自己構(gòu)建的,他說是抗生素問題…… 大神們幫我分析分析吧~ |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
| 如果構(gòu)建的載體沒有問題,出現(xiàn)衛(wèi)星菌落一般考慮一下幾個方面:一是抗生素出了問題;二是操作出了問題。抗生素放置時間過長或者溫度過高,也可能是紫外線燈因素影響,會出現(xiàn)失效的可能。在加氨芐的平板上涂布菌液時,可能由于氨芐濃度太低或者局部菌液太多,出現(xiàn)衛(wèi)星菌落情況。如果以上所有問題都已經(jīng)排除還是出現(xiàn)衛(wèi)星菌落,建議挑去衛(wèi)星菌落中間較大的菌落,成功率也還是比較高的。 |
金蟲 (正式寫手)
Dreamer

金蟲 (正式寫手)
銅蟲 (初入文壇)
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