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wandahuan銅蟲 (小有名氣)
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請大家?guī)臀铱纯次业膕outhern blot 圖片，不知道問題出在哪里了，謝謝 已有1人參與
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southern blot 實驗?zāi)康氖菫榱蓑炞C突變體基因被敲除（1,2分別是兩個不同突變體） 1.使用單酶切5小時左右； 2.基因組DNA濃度約為450ng/uL，上樣量每孔50微升，跑膠（0.8%）5小時左右，條帶很亮； 3.試劑盒是Roche Kit I, 洗脫條件為：68℃ 2×SSC，0.1%SDS 洗30min, 68℃ 0.5×SSC，0.1%SDS 洗15min，洗兩次； 4.探針是PCR目的基因部分片段的回收產(chǎn)物，大小約為400和700bp。 問題： 探針第一和第二次用的相同，第一次Marker（TAKARA DL15000）未雜出條帶，目的基因野生型與突變體有目的條帶； 第二次-1基因做出來了，-2效果不太好； 第三次-1是新做的探針，有雜帶，背景信號也很高，-2仍是之前的探針，卻沒有雜出目標條帶。 麻煩大家?guī)臀曳治龇治鍪鞘裁丛�，有什么好的解決方法。不甚感激~~~~ 第一次-1.jpg 第一次-2.jpg 第二次-1.jpg 第二次-2.jpg 第三次-1.jpg 第三次-2.jpg |
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