 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3535 | 回復(fù): 16 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
wandahuan銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
請大家?guī)臀铱纯次业膕outhern blot 圖片，不知道問題出在哪里了，謝謝 已有1人參與
|
|
|
southern blot 實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菫榱蓑?yàn)證突變體基因被敲除（1,2分別是兩個不同突變體） 1.使用單酶切5小時左右； 2.基因組DNA濃度約為450ng/uL，上樣量每孔50微升，跑膠（0.8%）5小時左右，條帶很亮； 3.試劑盒是Roche Kit I, 洗脫條件為：68℃ 2×SSC，0.1%SDS 洗30min, 68℃ 0.5×SSC，0.1%SDS 洗15min，洗兩次； 4.探針是PCR目的基因部分片段的回收產(chǎn)物，大小約為400和700bp。 問題： 探針第一和第二次用的相同，第一次Marker（TAKARA DL15000）未雜出條帶，目的基因野生型與突變體有目的條帶； 第二次-1基因做出來了，-2效果不太好； 第三次-1是新做的探針，有雜帶，背景信號也很高，-2仍是之前的探針，卻沒有雜出目標(biāo)條帶。 麻煩大家?guī)臀曳治龇治鍪鞘裁丛颍惺裁春玫慕鉀Q方法。不甚感激~~~~ 第一次-1.jpg 第一次-2.jpg 第二次-1.jpg 第二次-2.jpg 第三次-1.jpg 第三次-2.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有138人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- southern blot 的酶切問題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 請教一個southern blot問題
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】southern blot問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
wandahuan
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 174.6
- 帖子: 69
- 在線: 20.5小時
- 蟲號: 1823396
- 注冊: 2012-05-17
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
9樓2012-10-31 18:50:03
iriskye
銀蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 449
- 帖子: 125
- 在線: 4.8小時
- 蟲號: 298812
- 注冊: 2006-11-19
- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2012-10-16 22:54:15
wandahuan
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 174.6
- 帖子: 69
- 在線: 20.5小時
- 蟲號: 1823396
- 注冊: 2012-05-17
- 專業(yè): 植物病理學(xué)
3樓2012-10-17 21:53:21
lily981107
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 796.7
- 帖子: 78
- 在線: 109.4小時
- 蟲號: 2041065
- 注冊: 2012-10-03
- 專業(yè): 病毒學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵積極交流經(jīng)驗(yàn) 2012-10-24 15:13:47
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵積極交流經(jīng)驗(yàn) 2012-10-24 15:13:47
| 是什么材料的總DNA？真菌的總量5-10ug即可，植物的20ug左右。圖中判斷似乎沒有22ug的總量，總DNA量不夠是原因之一。此外marker太多，加入5ng即可。建議下次加入用做探針的pcr產(chǎn)物做對照（多加一個孔），是監(jiān)控反應(yīng)體系的標(biāo)準(zhǔn)之一。如果marke和pcr產(chǎn)物對應(yīng)條帶都很清楚，而樣品沒有條帶，其可能原因有兩點(diǎn)：DNA量不夠，轉(zhuǎn)膜效率太低。 |
5樓2012-10-20 11:54:04
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 337求調(diào)劑 +3 | 《樹》 2026-03-29 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 調(diào)劑考研 +3 | 王杰一 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 330分求調(diào)劑 +5 | qzenlc 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +7 | 璞玉~~ 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分 +4 | Shern—- 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338 +6 | YYYYYNNNNN 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +7 | A child 2026-03-28 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 張芳銘-中國農(nóng)業(yè)大學(xué)-環(huán)境工程專碩-298 +4 | 手機(jī)用戶 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +17 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)308分求調(diào)劑 +10 | 你好明天你好 2026-03-23 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)308分求調(diào)劑 +8 | 你好明天你好 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +6 | kotoko_ik 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)338求調(diào)劑！ +6 | Zuhui0306 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩 +4 | @taotao 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | Ymlll 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 上海電力大學(xué)材料防護(hù)與新材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收調(diào)劑研究生（材料、化學(xué)、電化學(xué)，環(huán)境） +4 | 我愛學(xué)電池 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085500機(jī)械專業(yè)總分300求調(diào)劑 +3 | an10101 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 335求調(diào)劑 +4 | yuyu宇 2026-03-23 | 5/250 |
|