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qdzrz123新蟲 (初入文壇)
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[求助]
HPLC峰出現(xiàn)分裂
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| 本人剛用HPLC一周，前幾次測標(biāo)線，峰型很好，后來幾次測試中，同樣的樣品（BPA標(biāo)準(zhǔn)系列或木屑材料吸附BPA后的樣品溶液），原來位置上的峰頂部發(fā)生了分裂，成了兩個(gè)分離不完全的兩個(gè)峰。我感覺不是污染造成的！ 請教高人，什么因素有可能導(dǎo)致這樣的結(jié)果？我改怎么解決呢？ |
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bcschina
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
聽不到: 金幣+2, 感謝您的解答，歡迎常來分析版 2012-11-07 23:13:18
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聽不到: 金幣+2, 感謝您的解答，歡迎常來分析版 2012-11-07 23:13:18
| 很容易判斷的是 首先看看 分裂后的峰 總面積是否能與未分裂的峰面積一致 若是 則可以判斷 不是污染 很明顯 是柱子的問題 可能是有死體積 固定穿坍塌或堵塞 柱內(nèi)固定相填充不均勻 導(dǎo)致樣品峰流過柱子時(shí) 形成兩處高濃度段 即兩個(gè)峰 從而不再是正相均態(tài)分布 懷疑可能受過高壓沖洗而坍塌 或者象樓上所說的 可能柱頭污染堵塞 流向路徑不一致 反沖清洗無效 就可以考慮換柱子 另外需要了解一下 只有一個(gè)峰出現(xiàn)分裂嗎 還是有別的峰也有分裂了 請嘗試適當(dāng)減少進(jìn)樣量 是否有改善 |
6樓2012-10-22 14:11:15
2樓2012-10-20 13:23:23
lifucheng
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3樓2012-10-20 15:07:09
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4樓2012-10-20 16:06:24
5樓2012-10-22 09:32:28
qdzrz123
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7樓2012-11-07 22:56:21
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【答案】應(yīng)助回帖
| 樓主摳門 給的金幣太少 沒動(dòng)力啊 哈哈 開個(gè)玩笑 分裂峰的原因很多 并不建議立刻反向沖洗 請先進(jìn)別的樣品看看 是否也有相同的情況 若有 基本可以判定是柱子問題 柱子制作固定床，在填充的時(shí)候 是往一個(gè)方向填充的 所以每根柱子都有流向標(biāo)識 如果反沖 小流量壓力還可以 較大的話 會把整個(gè)固定床沖松 垮塌 柱子很容易報(bào)廢 因?yàn)樗伤墓潭ù?死體積無數(shù) 出峰慘不忍睹 所以務(wù)必小心 我之前也有同事不做反沖 將進(jìn)樣柱前頭的固定相摳出 使用相同填料的濾芯柱 補(bǔ)充填入 然后擰緊封裝 效果據(jù)說不錯(cuò) 不過俺自己沒有這樣操作過 僅供你參考 謝謝 |
9樓2012-11-09 13:07:17
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本帖內(nèi)容被屏蔽 |
10樓2012-11-09 13:31:41
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