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杯子然金蟲 (著名寫手)
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[求助]
求木聚糖酶的測(cè)定！
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| 求教各位大俠：木聚糖酶酶活如何測(cè)定？小弟做木聚糖酶實(shí)驗(yàn)，粗酶稀釋500倍后測(cè)定得出酶活很低，請(qǐng)問(wèn)酶活達(dá)到1000—10000以上U/ml的是如何得出來(lái)的，稀釋了多少倍？若有高手做過(guò)的我想詳細(xì)求教下？謝謝 |
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daiybe
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daiybe
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【答案】應(yīng)助回帖
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rainwander: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-10-21 17:44:26
杯子然: 金幣+10, ★★★很有幫助, 多謝幫助 2012-10-23 19:26:10
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| 你看你買的酶制劑的包裝上關(guān)于其酶活力的定義,從中可以看出幾個(gè)關(guān)鍵的東西，該酶活測(cè)定的溫度，pH值，底物濃度等，然后按照這個(gè)去測(cè)定就可以了，每個(gè)公司的酶都有自己的特性，因?yàn)樗怯刹煌木N生產(chǎn)的，酶學(xué)性質(zhì)自然有很多的不同。如果你完全按照它酶活定義上的條件來(lái)測(cè)的話是可以測(cè)出它原來(lái)酶活的。按照問(wèn)的，如果酶活有1000U,那么稀釋倍數(shù)應(yīng)該在3000——4000倍左右為佳，主要看OD差值，一般要嚴(yán)格控制在0.4-0.6之間，低于0.4.要適當(dāng)減小稀釋倍數(shù)，大于0.6要適當(dāng)增加稀釋倍數(shù)。 |
3樓2012-10-21 12:14:16
杯子然
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4樓2012-10-22 08:51:58
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5樓2012-10-22 22:46:26
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