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zhangyehong新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
有關(guān)疏水層析的問(wèn)題
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求助,我近期從發(fā)酵液中分離脂肪酶,過(guò)完離子柱后,過(guò)疏水層析,用的是GE。幔耄簦嵯到y(tǒng),疏水預(yù)裝柱,洗脫液用的是10%的硫酸銨和磷酸緩沖液,但是上樣后,硫酸銨洗出了一個(gè)大峰,但是后來(lái)用緩沖液洗不下來(lái)目的蛋白,因?yàn)槲业臉悠酚蓄伾,所以從柱子上看到樣品還掛在柱子上,不知道什么原因,想求助一高手,實(shí)在沒(méi)轍了,希望和純化蛋白的高手交流交流。 [ Last edited by wizardfan on 2012-10-25 at 07:36 ] |
木蟲(chóng) (小有名氣)
| 你蛋白有輔酶或輔基嗎?蛋白的顏色是輔酶或輔基的顏色嗎?如果沒(méi)有輔酶,那么換低鹽溶液梯度洗脫,或換個(gè)低濃度的鹽上樣,或換個(gè)弱一點(diǎn)的疏水柱;如果有輔酶或輔基,那就是輔酶與蛋白分離了。實(shí)驗(yàn)順利。 |
專家顧問(wèn) (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |

新蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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