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想擴(kuò)增10kb多的基因簇，現(xiàn)在有什么技術(shù)可以一次性擴(kuò)增出來嗎
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| 10kb多的基因簇是連續(xù)的，想擴(kuò)增出來，在此問問蟲友們現(xiàn)在有什么技術(shù)可以解決這個(gè)問題呢？ |
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2樓2012-10-24 19:17:23
3樓2012-10-24 21:43:12
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8樓2012-10-24 21:55:46
zhwenxing
木蟲 (著名寫手)
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16樓2012-10-25 10:28:49
joan198108
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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17樓2012-10-25 10:58:42
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applexixixi(金幣+1): 謝謝參與
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-10-27 13:46:40
applexixixi(金幣+1): 謝謝參與
小丹木木: 金幣+2, 鼓勵(lì)交流 2012-10-27 13:46:40
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推薦一篇paper 如果愿意用的話 Full-length RecE enhances linear-linear homologous recombination and facilitates direct cloning for bioprospecting Jun Fu, Xiaoying Bian, Shengbaio Hu, Hailong Wang, Fan Huang, Philipp M Seibert, Alberto Plaza, Liqiu Xia, Rolf Müller, A Francis Stewart & Youming Zhang Affiliations Contributions Corresponding authors Nature Biotechnology 30, 440–446 (2012) doi:10.1038/nbt.2183 Received 24 October 2011 Accepted 16 March 2012 Published online 29 April 2012 Functional analysis of genome sequences requires methods for cloning DNA of interest. However, existing methods, such as library cloning and screening, are too demanding or inefficient for high-throughput application to the wealth of genomic data being delivered by massively parallel sequencing. Here we describe direct DNA cloning based on the discovery that the full-length Rac prophage protein RecE and its partner RecT mediate highly efficient linear-linear homologous recombination mechanistically distinct from conventional recombineering mediated by Redαβ from lambda phage or truncated versions of RecET. We directly cloned all ten megasynthetase gene clusters (each 10–52 kb in length) from Photorhabdus luminescens into expression vectors and expressed two of them in a heterologous host to identify the metabolites luminmycin A and luminmide A/B. We also directly cloned cDNAs and exactly defined segments from bacterial artificial chromosomes. Direct cloning with full-length RecE expands the DNA engineering toolbox and will facilitate bioprospecting for natural products. |
18樓2012-10-26 16:51:13
blackrose8089
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xachenxi4樓
2012-10-24 21:50
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woai8205樓
2012-10-24 21:51
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失落的豇豆6樓
2012-10-24 21:52
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neu2347樓
2012-10-24 21:53
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2012-10-24 22:07
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fangxin10樓
2012-10-24 22:09
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blackdogzmz11樓
2012-10-24 22:10
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D11402fc12樓
2012-10-24 22:12
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