 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (3545)
- >導(dǎo)師招生 (343)
- >考研 (294)
- >基金申請(qǐng) (261)
- >文獻(xiàn)求助 (138)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (121)
- >考博 (109)
- >休閑灌水 (46)
- >招聘信息布告欄 (31)
- >論文投稿 (30)
- >論文道賀祈福 (29)
- >博后之家 (20)
- >碩博家園 (18)
- >找工作 (17)
- >SciFinder/Reaxys (12)
- >教師之家 (11)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2953 | 回復(fù): 6 | ||
[求助]
如何測(cè)定酶促反應(yīng)的初速率
|
|
如何測(cè)定酶促反應(yīng)的初速率。 這是一道考研真題里的，他要求測(cè)定Km,Vmax和V0，前兩者我會(huì)用雙倒數(shù)作圖法就行，但V0，我想是不是就是測(cè)酶活力啊，而且書(shū)上說(shuō)，酶促反應(yīng)的初速率就是底物濃度變化在5%范圍內(nèi)時(shí)曲線(xiàn)的斜率，但是具體怎么控制不太清楚，希望師哥師姐幫忙解答一下 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿中海洋材料工程專(zhuān)碩330分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿西安交通大學(xué)材料工程專(zhuān)業(yè) 282分求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
332求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
294求調(diào)劑材料與化工專(zhuān)碩
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
281求調(diào)劑（0805）
已經(jīng)有17人回復(fù)
-
267一志愿南京工業(yè)大學(xué)0817化工求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
0817調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
焦慮
已經(jīng)有13人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 有誰(shuí)用過(guò)美國(guó)在線(xiàn)腐蝕速率測(cè)定儀
已經(jīng)有12人回復(fù)
- E.coli 生長(zhǎng)速率測(cè)定
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 大腸桿菌比生長(zhǎng)速率的測(cè)定方法
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 關(guān)于LI6400如何用于測(cè)量番茄葉片光合作用速率
已經(jīng)有17人回復(fù)
- U盤(pán)速度測(cè)試?yán)鳎瑴y(cè)測(cè)你的U盤(pán)存取速度吧！！
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 離心機(jī)速度檢測(cè)器壞了，求助
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 固體培養(yǎng)基培養(yǎng)霉菌的比生長(zhǎng)速率怎么測(cè)定
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助】哪位大蝦知道怎么測(cè)試污泥的耗氧速率OUR，需要專(zhuān)用的測(cè)試儀器么？？
已經(jīng)有5人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+3, 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖 2012-10-29 08:39:35
hello青果: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-10-29 12:49:26
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wizardfan: 金幣+3, 鼓勵(lì)新蟲(chóng)發(fā)帖 2012-10-29 08:39:35
hello青果: 金幣+2, ★★★很有幫助 2012-10-29 12:49:26
| 酶促反應(yīng)的初速率是反應(yīng)剛開(kāi)始時(shí)的速率，控制酶的量一定，加入不同量的底物，有的可以用分光光度法等實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)產(chǎn)物生成量，不能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的話(huà)就在反應(yīng)一段時(shí)間后取樣用HPLC測(cè)定產(chǎn)物濃度，用HPLC監(jiān)測(cè)最主要的是確定多長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)取樣才能代表初速度，有的是幾分鐘，有的是幾小時(shí)，這個(gè)要根據(jù)產(chǎn)物生成的量來(lái)判斷，然后用單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量代表反應(yīng)初速率 |
2樓2012-10-29 08:20:56
3樓2012-10-29 12:52:59
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hello青果: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2012-10-30 12:42:43
hello青果: 金幣+8, ★★★★★最佳答案 2012-10-30 12:42:43
|
你要測(cè)Km,Vmax就要測(cè)定一定的酶濃度下不同底物時(shí)的初速度，底物濃度的變化范圍可以從1/10km到10km,在這個(gè)范圍內(nèi)取幾個(gè)點(diǎn)比如c1,c2,c3,c4，分別測(cè)定這幾個(gè)底物濃度下的初速度v1,v2,v3,v4，根據(jù)米氏方程v=Vmax ×S/（Km+S）就能得到Km,Vmax，很簡(jiǎn)單的。難的是剛開(kāi)始的時(shí)候你并不知道多少底物能使這一定量的酶飽和，因此你要做個(gè)試驗(yàn)，配幾個(gè)底物梯度，比如1m/l 2m/l 3m/l 4m/l，比如它們的初速度分別為 0.1m/l.min，0.3m/l.min，0.5m/l.min，0.5m/l.min，我們可以看出后面兩個(gè)底物濃度下的初速度是一樣的，即酶在這兩個(gè)底物濃度下已經(jīng)飽和，我們就是通過(guò)這種方式來(lái)找出飽和底物濃度的，在飽和底物濃度下的初速度就是Vmax。還有一個(gè)問(wèn)題也很關(guān)鍵，就是如何知道你測(cè)的速度是初速度，如果能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的話(huà)那就很容易了，你可以得到一個(gè)產(chǎn)物濃度隨時(shí)間變化的曲線(xiàn)，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)需要你知道產(chǎn)物在多少波長(zhǎng)下有吸收峰，并且吸收值與濃度有線(xiàn)性關(guān)系；如果不能實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，我們是用HPLC來(lái)測(cè)產(chǎn)物濃度，隔一段時(shí)間取一次樣，還要弄清楚你的酶促反應(yīng)是什么時(shí)間尺度來(lái)計(jì)量，是秒，分鐘還是小時(shí)，這都需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定，像我們用的酶要用小時(shí)做時(shí)間尺度，我們是在反應(yīng)2h后取樣用H[LC測(cè)產(chǎn)物濃度來(lái)計(jì)算反應(yīng)的初速度。 你說(shuō)的“在底物濃度變化5%范圍內(nèi)求斜率”，這得出的是某一底物濃度下的初速度，底物和產(chǎn)物的濃度都要測(cè)，只做這一個(gè)曲線(xiàn)是得不到Km,Vmax的 |
4樓2012-10-29 19:25:26
5樓2012-10-30 12:43:36
923158905
銅蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1374.6
- 紅花: 1
- 帖子: 98
- 在線(xiàn): 64.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 2518924
- 注冊(cè): 2013-06-23
- 專(zhuān)業(yè): 生物化工與食品化工
|
您好，測(cè)定初速度時(shí)教科書(shū)上要求底物消耗在5%以?xún)?nèi)，如果按照此要求進(jìn)行測(cè)定，誤差會(huì)不會(huì)很大? 有文獻(xiàn)里測(cè)定不同酶濃度和不同反應(yīng)時(shí)間的反應(yīng)速率以找出合適的酶濃度和反應(yīng)時(shí)間，這樣做的具體作用是什么？如果滿(mǎn)足底物5%消耗是否就不用找出合適的酶濃度和反應(yīng)時(shí)間？只有當(dāng)?shù)孜锍^(guò)5%才考慮酶濃度和反應(yīng)時(shí)間在線(xiàn)性范圍內(nèi)，請(qǐng)問(wèn)是這樣嗎？ |
6樓2016-01-13 22:00:51
檸檬Anny
新蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 5
- 帖子: 1
- 在線(xiàn): 11分鐘
- 蟲(chóng)號(hào): 8530502
- 注冊(cè): 2018-04-15
|
您好，想請(qǐng)教關(guān)于酶促反應(yīng)速率，Vmax，Km，的問(wèn)題，您之前的解答我已經(jīng)看過(guò)了，也做了實(shí)驗(yàn)，可實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)波動(dòng)性太大，不知如何選擇 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶(hù)端 |
7樓2018-04-15 14:11:33
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 hello青果 的主題更新
| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | ydfyh 2026-03-17 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 267一志愿南京工業(yè)大學(xué)0817化工求調(diào)劑 +10 | SUICHILD 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
[教師之家] 焦慮 +9 | 水冰月月野兔 2026-03-13 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +6 | S.H1 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +4 | 守候夕陽(yáng)CF 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +3 | 何潤(rùn)采123 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專(zhuān)碩274一志愿陜西師范大學(xué)求調(diào)劑 +6 | 薛云鵬 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +10 | 呼呼呼。。。。 2026-03-17 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +8 | 大可digkids 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 被我言中：新模板不強(qiáng)調(diào)格式了，假專(zhuān)家開(kāi)始管格式了 +4 | beefly 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +7 | 好運(yùn)連綿不絕 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | Zz版 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | p asserby. 2026-03-15 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 302求調(diào)劑 +4 | 小賈同學(xué)123 2026-03-15 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研]
 11408 一志愿西電，277分求調(diào)劑
+3
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 255求調(diào)劑 +3 | 李嘉慧， 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 土木第一志愿276求調(diào)劑，科研和技能十分豐富，求新興方向的導(dǎo)師收留 +3 | 土木小天才 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 152697 2026-03-12 | 4/200 |
|