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無蟲 (小有名氣)

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[求助] pET-40b蛋白表達(dá)

近期我用pET-40b載體表達(dá)蛋白，現(xiàn)在蛋白表達(dá)后過Ni柱發(fā)現(xiàn)有點(diǎn)問題：pET-40b Dsbc后帶有His標(biāo)簽，多克隆位點(diǎn)末尾也帶有His標(biāo)簽，我構(gòu)建克隆是兩個(gè)His標(biāo)簽都保留了，用凝血酶切后Dsbc和目的蛋白都帶有His標(biāo)簽，過Ni柱不好分開，當(dāng)初就是為了和Ni柱結(jié)合牢固才保留兩個(gè)His標(biāo)簽，現(xiàn)在不想重新構(gòu)建克隆，不知哪位高人有什么好的辦法。目的蛋白15KD，Dsbc大約34KD。

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1樓 2012-10-28 22:29:14

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鐵蟲 (正式寫手)

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